脐带间充质干细胞向胶质瘤干细胞趋向性机制研究

• 作者: 刘振林 李罡 苏小营 董桂娟 邱瑾
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 肿瘤干细胞 间充质干细胞 趋向性
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 神经胶质瘤
• 页码范围: 1189-1195
• 页数: 7页
• 分类号: R730.264
• 字数: 5448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2015.12.001

摘要

目的 研究脐带间充质干细胞(UCMSCs)向胶质瘤干细胞的趋化迁移功能及其内在机制. 方法 原代分离培养并鉴定UCMSCs,用软、硬琼脂糖凝胶培养基质联合胶质瘤干细胞维持因子[表皮生长因子(EGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]诱导胶质瘤干细胞限定在静息、增殖和分化状态,分别为软琼脂+EGF+bFGF组、硬琼脂+EGF+bFGF组、硬琼脂组,持续培养3组干细胞克隆球7d并绘制克隆球直径生长曲线;培养72 h后流式细胞仪检测3组胶质瘤干细胞的细胞周期;免疫荧光染色检测3组胶质瘤干细胞克隆球CD133、增殖细胞相关的核抗原(Ki67)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;Transwell实验检测UCMSCs向不同状态胶质瘤干细胞的迁移能力;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测不同状态胶质瘤干细胞培养液中干细胞因子(SCF)、基质衍生因子-1(SDF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达;用培养72 h的3组干细胞的条件培养液为培养基培养UCMSCs,Western blotting检测UCMSCs中c-Kit、趋化因子受体-4(CXCR4)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)蛋白的表达. 结果 培养2～7 d时硬琼脂+EGF+bFGF组和硬琼脂组胶质瘤干细胞克隆球直径大于软琼脂+EGF+bFGF组,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞周期检测显示软琼脂+EGF+bFGF组、硬琼脂+EGF+bFGF组、硬琼脂组胶质瘤干细胞分别限定在静息、增殖和分化状态;软琼脂+EGF+bFGF组胶质瘤干细胞克隆球高表达CD133 [(95.79±5.31)％],硬琼脂+EGF+bFGF组细胞克隆球高表达Ki67 [(89.39±7.45)％]、GFAP[(63.49± 16.54)％];硬琼脂组细胞克隆球高表达GFAP[(97.36±3.48)％];Transwell实验显示硬琼脂+EGF+bFGF组细胞迁移百分率高于软琼脂+EGF+bFGF组、硬琼脂组,差异有统计学意义(P＜0.05);硬琼脂+EGF+bFGF组条件培养液中SCF、SDF-1和VEGF蛋白的含量高于软琼脂+EGF+bFGF组和硬琼脂组,差异均有统计学意义(P＜0.05);UCMSCs培养于硬琼脂+EGF+bFGF组条件培养液中时c-Kit、CXCR4和VEGFR蛋白表达水平均高于软琼脂+EGF+bFGF组和硬琼脂组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 UCMSCs向静息状态下的胶质瘤干细胞存在靶向迁移功能缺陷,SCF/c-Kit、SDF-1/CXCR4和VEGF/VEGFR轴表达缺陷可能是其潜在的内在机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏小营	天津市口腔医院儿童口腔科	5	0	0.0	0.0
2	邱瑾	天津安捷医院神经外科	2	1	1.0	1.0
3	董桂娟	天津安捷医院神经外科	1	0	0.0	0.0
4	李罡	天津安捷医院神经外科	2	0	0.0	0.0
5	刘振林	天津安捷医院神经外科	3	5	1.0	2.0