小干扰RNA沉默 HlF-1α对缺氧状态下脉络膜黑色素瘤细胞中MMP-2表达的影响

• 作者: 卢发艳 周占宇 张霆 王爽 王良雨 苑伏香 赵娟
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 关键词: 脉络膜黑色素瘤 缺氧 HIF-1α MMP-2 小干扰RNA
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 1139-1142
• 页数: 4页
• 字数: 4885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3980/j.issn.1672-5123.2015.7.05

摘要

目的：：以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1( hypoxia inducible factor-1, HIF-1)基因,在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤( human uveal melanoma cell,OCM-1)细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)基因表达的影响。方法：将脉络膜黑色素瘤细胞分为正常组与缺氧组,其中将缺氧组再分成单纯缺氧组、干扰组、脂质体对照组、阳性对照组和阴性对照组；对正常组细胞用含有浓度为10％的胎牛血清和1％的双抗(青-链霉素混合液)的DMEM 高糖培养基进行培养。在缺氧组人眼OCM-1细胞的培养瓶中加入100μmol/ L CoCl2以构建肿瘤细胞内部的缺氧微环境。干扰组转染HIF-1α siRNA,阴性对照组转染无义siRNA,阳性对照组转染β-actin siRNA,脂质体对照组转染空脂质体。RT-PCR 检测细胞中HIF-1α和MMP-2 mRNA 的表达,行Western-blot 检测HIF-1α和MMP-2蛋白的表达。结果：与正常组相比,单纯缺氧组HIF-1α蛋白的表达增高(P<0.05),而其mRNA 表达量无明显变化(P>0.05)； MMP-2 mRNA 及蛋白的表达升高(P<0.05)。缺氧培养的各组之间相比,阳性对照组β-actin mRNA 表达下降(P <0.05),证实转染成功；干扰组HIF-1αmRNA 和MMP-2 mRNA 和蛋白表达均下降(P<0.05),阴性对照组、脂质体对照组各检测因素均无明显差别(P>0.05)。结论：缺氧条件下可以提高人眼脉络膜黑色素瘤细胞中 HIF-1α蛋白的表达,而且HIF-1α蛋白的表达水平可以影响MMP-2的转录与翻译,从而可能进一步影响人眼脉络膜瘤细胞的外周浸润和远处转移能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵娟		6	10	2.0	3.0
2	苑伏香		1	2	1.0	1.0
3	张霆		1	2	1.0	1.0
4	周占宇		1	2	1.0	1.0
5	王良雨		1	2	1.0	1.0
6	王爽		1	2	1.0	1.0
7	卢发艳		2	3	1.0	1.0