阳离子脂质体介导RNA干扰的效果评价

• 作者: 刘姿 孙永 孙耀庭 张树彪 王恩霞 甄宇红 赵轶男 郭鑫 韩文琦
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 阳离子脂质体 荧光素酶 A549细胞 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 生物技术与方法
• 页码范围: 1239-1246
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.140520

摘要

考察自制的肽型阳离子脂质体CDO14作为RNA转染载体的细胞毒性及其运载siRNA进行RNA干扰的效果.通过MTT法检测脂质体对稳定表达荧光素酶的肺癌A549 (Luc-A549)细胞的毒性.以脂质体为载体将荧光素酶siRNA (Luc-siRNA)转染至Luc-A549细胞内,用发光仪检测转染细胞内荧光素酶含量,BCA法检测细胞内总蛋白含量.在裸鼠腋下接种Luc-A549细胞,成瘤后尾静脉注射Luc-siRNA和脂质体的复合物,利用活体成像系统检测模型小鼠体内荧光素酶的表达量.细胞毒性实验表明,自制脂质体的毒性与商品脂质体DOTAP相近,低于商品脂质体Lipo2000;细胞转染实验表明自制脂质体作为基因转染载体的转染效率高于DOTAP;体内转染实验表明CDO14作为载体转染效果优于DOTAP.结果表明,肽型阳离子脂质体CDO14具有毒性小、转染效率高等优点,有望作为转染载体用于基因治疗.