线粒体转录因子A相关的微小RNA在结肠癌中的表达和增殖调控研究

• 作者: 何裕隆 吴恺明 彭建军 李广华
• 来源期刊: 中华胃肠外科杂志
• 关键词: 结肠肿瘤 微小RNA 线粒体转录因子A 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1041-1046
• 页数: 6页
• 字数: 4029字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0274.2015.10.017

摘要

目的：筛选并验证可调控结肠癌细胞增殖的微小RNA﹙miRNA)。方法以癌基因线粒体转录因子A﹙TFAM)作为靶基因,通过miRWalk 2.0软件筛选可能调控结肠癌增殖的miRNA。通过实时荧光定量PCR检测miRNA在30例结肠癌手术标本和3种结肠癌细胞系﹙SW480、HT-29和HCT116)中的表达。选取其中表达量最低的miR-204和SW480进行后续研究。双荧光素酶报告基因实验验证TFAM和miR-204的作用关系。分别应用miR-204慢病毒和anti-miR-204慢病毒上调和下调miR-204的表达,通过Western blot检测慢病毒感染后SW480细胞中TFAM蛋白水平的变化；并采用MTT实验和BrdU实验观察慢病毒感染后SW480细胞增殖能力的变化。结果初筛获得miR-204、miR-211、miR-214、miR-381、miR-590-3p 5种miRNA,其中miR-204、miR-211、miR-214和miR-381在结肠癌组织中的表达较癌旁组织明显降低﹙P<0.05),在3种结肠癌细胞中的表达亦较正常结肠细胞降低﹙P<0.05),其中miR-204的表达量最低；而miR-590-3p表达水平则在结肠癌组织和3种结肠癌细胞中均明显上调﹙P<0.05)。结肠癌组织中miR-204表达与TFAM表达呈显著负相关﹙P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示TFAM与miR-204可直接结合。通过慢病毒感染上调miR-204表达后,SW480细胞中TFAM蛋白表达下降,细胞增殖能力升高﹙P<0.05)；下调miR-204表达后,TFAM蛋白表达升高,细胞增殖能力下降﹙P<0.05)。结论 miR-204可以通过降低TFAM的蛋白表达来抑制结肠癌细胞的增殖。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何裕隆	中山大学附属第一医院胃肠外科中心	205	1367	19.0	27.0
2	吴恺明	中山大学附属第一医院胃肠外科中心	18	80	5.0	8.0
3	彭建军	中山大学附属第一医院胃肠外科中心	29	147	7.0	11.0
4	李广华	中山大学附属第一医院胃肠外科中心	3	17	2.0	3.0