基于cDNA-AFLP的N+离子注入甘草当代根部基因表达分析

• 作者: 刘腾 薛丹 那日 郭九峰
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 离子束诱变 甘草 cDNA-AFLP 基因表达差异
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1074-1080
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.06.1074

摘要

为研究离子束注入对甘草基因表达的影响,本文用低能N+离子束注入甘草种子,以未经处理的同批甘草种子作为对照,利用cDNA-AFLP技术分析甘草幼根基因的表达差异;以甘草幼根总RNA为模板,通过反转录合成cDNA双链,使用PstⅠ和MseⅠ酶切双链cDNA,后经接头连接,预扩增,选择性扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳得到cDNA-AFLP图谱;9对选择性扩增引物总共出现条带1576条,差异条带286条,约占总条带的20％,对其中105个表达差异显著的片段进行测序,最终得到92个差异片段的核苷酸序列.通过Blast分析,其中53条测序序列检索到与之同源性高的DNA序列或已知功能的蛋白mRNA序列;成功构建离子注入甘草的当代根部基因表达cDNA-AFLP体系,证实了离子束注入甘草种子对当代甘草根部基因表达的影响,为建立甘草品质育种提供参考.