过氧化氢对NIH/3T3细胞蛋白磷酸酶2A催化亚基C甲基化的影响

• 作者: 刘银品 唐深 孙斌 李习艺 秦富 许扬 陆彩玲
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧化氢 磷蛋白磷酸酶 甲基化
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 272-276
• 页数: 5页
• 分类号: R966
• 字数: 2974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2015.02.014

摘要

目的：探讨过氧化氢(H2 O2)对 NlH/3T3细胞中蛋白磷酸酶2A 催化亚基 C(PP2Ac)甲基化的影响。方法① H2 O20,0.1,1,5,10和25 mmol??L-1刺激 NlH/3T3细胞1 h,刃天青还原率检测细胞活性；② Western 蛋白印迹法检测 H2 O20,0.1,1和5 mmol??L-1作用1 h 后细胞内去甲基 PP2Ac 的表达；③分别用羧基端甲基酯酶(PME-1)抑制剂 AMZ300,0.1,0.5,1.0,5.0和10.0μmol??L-1和抗氧化剂 N-乙酰半胱氨酸(NAC)0,0.5,1和5 mmol??L-1预处理细胞30 min,再用 H2 O21 mmol??L-1作用细胞1 h,Western 蛋白印迹法检测细胞内去甲基 PP2Ac 的表达；④免疫荧光实验观察 NlH/3T3细胞 H2 O21 mmol??L-1处理1 h、AMZ3010.0μmol??L-1或 NAC 1 mmol??L-1分别预处理30 min 后再加 H2 O21 mmol??L-1处理1 h 细胞内去甲基 PP2Ac 的表达。结果①刃天青检测实验结果显示,H2 O2对细胞增殖具有显著的抑制作用,浓度≥0.1 mmol??L-1细胞活性显著降低(P<0.01)；② Western 蛋白印迹检测结果显示,H2 O2可致 NlH/3T3细胞内去甲基 PP2Ac 蛋白表达升高,H2 O20.1,1和5 mmol??L-1组与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)；③ Western 蛋白印迹结果显示,AMZ30与 NAC 二者均可拮抗 H2 O2对细胞内 PP2Ac 去甲基的作用,与H2 O21 mmol??L-1组相比,加入 AMZ305.0和10.0μmol??L-1或 NAC 1和5 mmol??L-1细胞内去甲基 PP2Ac含量明显降低(P<0.01)；④免疫荧光实验结果显示,加入 H2 O21 mmol??L-1刺激1 h 后,细胞内去甲基PP2Ac 的表达要高于正常细胞组,而用 AMZ3010.0μmol??L-1与 NAC 1 mmol??L-1干预后,去甲基 PP2Ac表达降低。结论 H2 O2可诱导 NlH/3T3细胞内 PP2Ac 去甲基,而 PME-1抑制剂 AMZ30和抗氧化剂NAC 均能拮抗 H2 O2诱导的 PP2Ac 去甲基作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐深	广西医科大学基础医学院	27	94	5.0	9.0
2	陆彩玲	广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室	32	179	8.0	12.0
3	孙斌	广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室	12	78	6.0	8.0
4	刘银品	广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室	2	2	1.0	1.0
5	秦富	广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室	5	6	2.0	2.0
6	许扬	广西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室	1	2	1.0	1.0