蛋白磷酸酶2A催化亚基下调参与人tau蛋白所致线粒体分裂融合和功能失衡

• 作者: 喻丽玲 李夏春 柳秀平 胡娟 郑铮
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 蛋白磷酸脂酶2A 原代海马神经元 人胚肾母细胞瘤 线粒体分裂融合动态 线粒体融合蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 297-306
• 页数: 10页
• 分类号: Q189
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.12163

摘要

目的 探讨蛋白磷酸酶2A催化亚基(PP2Ac)下调是否参与人tau蛋白积聚引起的线粒体分裂融合动态及功能失衡的机制.方法 大鼠原代海马神经元转染mito-dsRed质粒和人tau40质粒48 h后,共聚焦显微镜观测线粒体分布,免疫印迹检测线粒体分裂融合蛋白、PP2Ac及PP2A调节亚基b(PP2Ab)表达水平;大鼠原代海马神经元和野生型HEK293细胞(293wt)共转染siPP2Ac-EGFP质粒和mito-dsRed质粒48 h后,检测线粒体形态和分布;293wt细胞共转染siPP2Ac质粒和mito-Dendra2质粒40h后,实时观测线粒体分裂融合动态;293wt细胞沉默PP2Ac表达后,检测线粒体分裂融合蛋白水平及细胞膜电位和细胞活力;稳定表达人tau的HEK293细胞(293htau)共转染PP2Ac-EGFP质粒和mito-dsRed质粒48 h后,分析线粒体分布和形态及功能.结果 大鼠原代海马神经元表达人tau蛋白引起突起线粒体分布下降并伴有PP2Ac水平显著下降(t=4.814,P=0.0086).下调PP2Ac表达引起大鼠原代海马神经元和HEK293细胞线粒体变长并异常分布于细胞核周围;引起293wt细胞线粒体融合明显加速(=2.857,P=0.0074);使293wt细胞融合蛋白线粒体融合蛋白(MFN)1(t=6.768,P=0.0025)、MFN2(t=3.121,P=0.0035)和视神经萎缩蛋白1水平显著升高(t=3.775,P=0.0199),动力样蛋白1和Fis1水平不变;使HEK293细胞线粒体相对膜电位(t=2.300,P=0.0270)和细胞活力(=6.249,P＜0.0001)显著降低.上调PP2Ac表达可减轻293htau细胞线粒体形态和分布及功能异常.结论 PP2Ac表达下调参与了人tau蛋白引起的大鼠原代海马神经元和HEK293细胞线粒体形态分布异常及细胞活力下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑铮	三峡大学第一临床医学院肿瘤科	4	35	1.0	4.0
2	李夏春	三峡大学医学院生理与病理生理学系	25	34	3.0	4.0
3	胡娟	三峡大学第一临床医学院肿瘤科	3	2	1.0	1.0
4	柳秀平	杭州市中医院检验科	5	6	2.0	2.0
5	喻丽玲	三峡大学医学院生理与病理生理学系	1	0	0.0	0.0