shRNA干扰PLCε1基因对人食管癌Eca109细胞增殖和细胞周期的影响

• 作者: 周荣秒 李宾 李琰 牛朝旭 王娜 霍向然 黄茜
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: PLCε1基因 食管癌 RNA干扰 增殖
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 208-212
• 页数: 5页
• 分类号: R737.11
• 字数: 2555字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨沉默PLCε1基因对食管癌Eca109细胞增殖和细胞周期的影响及其可能的机制。方法 PLCε11、PLCε12和PLCε13质粒表达载体用于沉默PLCε1，通用阴性对照质粒表达载体HK作为对照。用阳离子脂质体进行转染，筛选出干扰效果最好的质粒表达载体（ PLCε12）。实验分为Eca109组、HK组和PLCε12组。 MTT检测细胞的存活率。 FCM检测细胞周期，RT-PCR检测细胞P16、CyclinD1基因 mRNA表达。结果 HK、PLCε12质粒表达载体转染Eca109细胞后48和72 h，PLCε12组Eca109细胞的存活率分别为80.73％和75.88％，显著低于HK组（ P＜0.001）。 Eca109细胞转染后24 h，PLCε12组处于S期的细胞比例明显低于HK组（ P＜0.01），细胞周期阻滞于G0／G1期。质粒表达载体转染Eca109细胞48 h后，PLCε12组Eca109细胞P16基因mRNA表达水平明显高于HK组（ P＜0.01）。结论沉默PLCε1基因可能通过上调Eca109细胞P16基因的表达，阻止细胞周期从G1期向S期的过渡，抑制Eca109细胞的增殖活性。