小鼠高迁移率族蛋白B1基因短发卡RNA的构建及干扰效果检测

• 作者: 余枭 朱红伟 李志强 黄利华
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 高迁移率族蛋白B1 RNA干扰 shRNA载体
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 胰腺外科
• 页码范围: 45-47
• 页数: 3页
• 字数: 2722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.01.015

摘要

目的 构建有效靶向小鼠高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)基因的短发卡RNA(shRNA)载体.方法 针对小鼠HMGB1序列设计4条HMGB1干扰序列的shRNA载体:pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4以及与哺乳动物基因组无同源性序列的shRNA作为对照(NC)组,Xho Ⅰ酶切鉴定其序列.然后利用质粒转染小鼠肝癌细胞株Hepal-6,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测干扰效率.结果 经酶切凝胶电泳证实shRNA构建正确;质粒筛选结果表明,转染48h后,pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4及NC组的荧光表达率为85％、78％、75％、70％、60％;FQ-PCR显示pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4组及NC组转染Hepal-6细胞48h后相对表达量分别为0.52±0.05、0.59±0.08、0.61±0.08、0.57±0.21、1.02±0.21.结论 成功构建表达靶向HMGB1的4条shRNA重组质粒载体,其中pYr-1.1-musHMGB1-sh1质粒对HMGB1基因的抑制作用最强,为研究HMGB1的功能提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余枭	中南大学湘雅三医院胃肠胰外科	35	191	7.0	13.0
2	黄利华	中南大学湘雅三医院中心实验室	39	99	5.0	8.0
3	李志强	中南大学湘雅三医院胃肠胰外科	12	24	2.0	4.0
4	朱红伟	中南大学湘雅三医院胃肠胰外科	10	23	3.0	4.0