基因芯片检测鱼类病毒的方法建立与优化

• 作者: 史成银 李晋 王胜强 粟子丹 耿伟光
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 病毒 基因芯片 高通量检测 鱼类
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 技 术 支 撑
• 页码范围: 77-81,84
• 页数: 6页
• 分类号: S941.41|Q78
• 字数: 4186字
• 语种: 中文

摘要

本研究建立并优化了一种基因芯片检测方法，可以同步检测7种重要的海水养殖鱼类病毒（淋巴囊肿病毒、细胞肿大病毒属虹彩病毒、赤点石斑鱼神经坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性胰脏坏死病毒、病毒性出血败血症病毒、传染性鲑贫血病毒）。该基因芯片包含10条病毒特异性的寡核苷酸探针（25~30 mer）分别与病毒的CP、N、VP5、G、NS、MA等基因位点互补。将各病毒基因探针以50% DMSO稀释至20μmol/L，使用PersonalArrayer 16个人点样仪在醛基修饰玻片上点样，然后与Cy3标记的扩增产物在47℃条件下杂交1.5 h，最后在LuxScan 10K扫描仪上采集荧光信号、判断检测结果。初步应用表明，该基因芯片检测方法具有良好的特异性和可靠性，在鱼类病毒高通量检测技术领域有广泛的应用前景。