CD19基因过表达K562细胞株及NOD-SCID小鼠皮下移植瘤模型的建立

• 作者: 何妙侠 唐古生 杨建民 王扬 程辉 阮婕 陈科婷
• 来源期刊: 白血病·淋巴瘤
• 关键词: 基因,CD19 转染 K562细胞 小鼠,NOD-SCID 异种移植模型
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 715-721
• 页数: 7页
• 字数: 6971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2015.12.003

摘要

目的 建立人CD19基因过表达的K562细胞株(CD19-K562)NOD-SCID小鼠皮下移植瘤模型.方法 克隆人CD19基因构建MigR1-CD19反转录病毒载体,转入Plat-A包装细胞,病毒上清转染K562细胞,反转录聚合酶链反应(PCR)及流式细胞术检测转染细胞CD19基因和蛋白表达,体外反复传代获得CD19-K562稳定转染细胞株,锥虫蓝染色,细胞计数检测细胞增殖,Annexin V/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡.CD19-K562细胞株皮下接种NOD-SCID小鼠并经体内外传代后建立移植瘤亚系CD19-K562-a,建立NOD-SCID小鼠皮下移植瘤模型.应用反转录PCR、瑞特染色、免疫组织化学等方法验证CD19-K562-a细胞性质.结果 成功建立了人CD19-K562细胞稳定株,CD19阳性率(99.80±0.17)％.CD19-K562细胞增殖、凋亡未受转染及传代影响.CD19-K562细胞稳定株皮下接种NOD-SCID小鼠后经体外结合体内传代建立移植瘤亚系CD19-K562-a,其CD19阳性率为(99.78±0.04)％,CD19-K562-a和CD19-K562细胞均呈未分化形态.CD19-K562-a皮下接种NOD-SCID小鼠成功建立移植瘤模型,CD19-K562-a瘤体CD19基因表达强阳性.结论 通过构建MigR1-CD19重组载体获得CD19基因过表达的K562稳定转染细胞株(CD19-K562),同时采用体外结合体内传代建立稳定成瘤的NOD-SCID小鼠移植瘤亚系CD 19-K562-a并成功建立NOD-SCID小鼠皮下移植瘤模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐古生	第二军医大学附属长海医院血液内科全军血液病研究所	44	284	11.0	14.0
2	何妙侠	第二军医大学附属长海医院病理科	54	196	8.0	11.0
3	程辉	第二军医大学附属长海医院血液内科全军血液病研究所	15	57	4.0	7.0
4	阮婕	复旦大学生命科学学院遗传所	2	1	1.0	1.0
5	王扬	第二军医大学附属长海医院血液内科全军血液病研究所	4	10	2.0	3.0
6	陈科婷	第二军医大学附属长海医院血液内科全军血液病研究所	2	0	0.0	0.0