缺氧诱导肿瘤细胞BCL-2表达促进LPPCN样细胞核凝集的形成

• 作者: 古强 孙保存 孟洁 董学易 赵楠 赵秀兰
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧 核凝集 BCL-2
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1258-1262,1266
• 页数: 6页
• 分类号: R730.2
• 字数: 4676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13315/j.cnki.cjcep.2015.11.014

摘要

目的 模拟缺氧微环境分析缺氧条件下BCL-2表达及其对核凝集形成的影响,探讨线形程序性坏死(linearly patterned programmed cell necrosis,LPPCN)样细胞核凝集形成的分子机制.方法 利用CoCl2缺氧模型模拟肿瘤细胞缺氧微环境,以B16黑色素瘤细胞系作为研究对象观察核凝集出现时肿瘤细胞的变化;利用伤口愈合实验、SRB实验评价缺氧对肿瘤细胞迁移、增殖的影响;应用Western blot和RT-PCR检测缺氧对凋亡相关分子BCL-2蛋白和RNA表达的影响;利用免疫荧光技术观察缺氧对BCL-2表达定位的影响.结果 缺氧36 ～48 h后,采用Hochest 33342活体细胞染色,荧光显微镜下可见30％以上胞核呈高度凝集状态,表现为单个凝集体或多个连接的小凝集体,未见明显的凋亡;缺氧可以明显抑制肿瘤细胞的增殖和迁移能力;在缺氧条件下,BCL-2表现出随时间变化的特征性表达谱,与肿瘤细胞核凝集出现的时间一致.结论 缺氧可诱导肿瘤细胞核凝集的形成,呈现与LPPCN细胞同样的特点;缺氧条件下存活的肿瘤细胞表现出更强的运动潜能;缺氧条件下抗凋亡蛋白BCL-2表达高峰的形成可能与核凝集有关.