Notch信号对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡的保护作用

• 作者: 卢建民 孙晓晶 张珍珍 秦秀虹 邵明阳 马翔
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: Notch1 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1 核因子-κB 视网膜血管内皮细胞 糖尿病视网膜病变
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 806-809,815
• 页数: 5页
• 字数: 4632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2015.0221

摘要

目的 探讨Notch1信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[Poly(ADP-ribose) polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的p50亚单位(NF-κB50)介导的人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVECs)凋亡的抑制作用.方法 体外培养人RVECs及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖(葡萄糖浓度为30 mmol·L-1)人RVECs细胞模型.构建pCMV-Script-Notch1和pCMV-Script-DLL4质粒,酶切鉴定后Western Blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,同时合成siNotch1并转染高糖培养的人RVECs,Westem Blot法检测Notch基因敲除效果.应用免疫共沉淀及Western Blot法检测siNotch1对高糖下PARP-1和NF-κB的相互作用的影响;应用Western Blot法检测高糖条件下Notch1/DLL4上调和下调后人RVECs中PARP-1、p-AKT、NF-κB50及caspase-3的表达变化.结果 人RVECs复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象.免疫共沉淀结果显示高糖组培养的人RVECs其PARP-1结合的NF-κB50的量较正常对照组增加;将siNotch1转染高糖组培养的人RVECs后或同时加入DLL4,则人RVECs中PARP-1结合的NF-κB50的量较前增加显著,提示Notch能抑制高糖下PARP-1和NF-κB50的相互作用.Western Blot检测结果显示高糖条件下,Notch1和DLL4上调后其PARP-1及caspase-3表达量较前显著降低;Notch1下调后其PARP-1及caspase-3表达量较前增加;p-AKT表达量则相反;提示Notch信号能抑制高糖诱导的PARP-1及caspase-3的激活及表达.结论 高糖情况下Notch信号可调控PARP-1和NF-κB的相互作用,并抑制PARP-1激活引起的人RVECs的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马翔	大连医科大学附属第一医院眼科	51	131	6.0	9.0
2	卢建民	大连医科大学附属第一医院眼科	22	62	4.0	6.0
3	邵明阳	大连医科大学附属第一医院眼科	3	4	1.0	2.0
4	秦秀虹	大连医科大学附属第一医院眼科	17	61	4.0	7.0
5	张珍珍	上海交通大学附属上海市第一人民医院眼科	12	28	4.0	4.0
6	孙晓晶	大连医科大学附属第一医院眼科	6	6	2.0	2.0