人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR－ABL适配子筛选及结构分析

• 作者: 平娟 张伟 张倩 申智慧 赵娜 阴明星 陈传波 马雪姗
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SELEX技术 慢性粒细胞白血病 融合蛋白BCR-ABL 适配子 筛选
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 82-85
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.01.017

摘要

目的：筛选、鉴定人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR－ABL适配子。方法：利用SELEX（ Systematic evolution of ligands by exponential）技术，以高纯度融合蛋白BCR－ABL为靶分子，从体外化学合成的长度为90 bp的随机单链DNA文库中来筛选与融合蛋白BCR－ABL特异性结合的寡核苷酸适配子，并进行解离常数（ Kd）值测定和适配子序列测定，再分别用Clustal W软件包和DNA Folding Sever分析适配子一级结构及二级结构，以酶联仪测定OD450值，根据OD值高低判定适配子亲和力大小。结果：经过13轮筛选，随机ssDNA文库与融合蛋白的亲和率从0．3％上升到47．1％，所有的一级结构没有共同的同源序列，二级结构分析结果显示，茎和环等二级结构可能是适配子和融合蛋白BCR－ABL结合的基础，其中，寡核苷酸适配子A2与BCR－ABL亲和力最高，kd值达72 nmol／L。结论：利用随机寡核苷酸文库筛选技术成功获得抗融合蛋白适配子，为临床上治疗和预防慢性粒细胞白血病提供一定的参考。