不同配比冻存液对兔脂肪干细胞液氮冻存效果的研究

• 作者: 吴彩凤 姚永明 张帆 张泽敏 杨彪炳 牛常英 胡飞 阎贺
• 来源期刊: 中国美容医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 脂肪来源干细胞 冻存液 液氮
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 4043字
• 语种: 中文

摘要

目的：探究不同浓度配比冻存液对脂肪干细胞(Adipose-derived Stem Cells，ADSCs)冻存复苏后存活率及增殖活性的影响。方法：无菌条件下取新西兰大白兔的脂肪组织，体外分离、培养ADSCs并传代至第3代，行免疫细胞化学染色对其表面标志物进行鉴定，同时对其行成软骨及成表皮细胞诱导以证实其多项分化能力。将第3代ADSCs置于液氮（-196℃）中冻存，根据冻存液中培养基（DMEM）、胎牛血清（Fetal bovine serum，FBS）及二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)的配比不同分为8组：①含不同浓度FBS配比分组：A组（70% DMEM +20% FBS+10% DMSO）、B组（60% DMEM +30%FBS+10%DMSO）、C组（50%DMEM +40%FBS+10%DMSO）、D组（含有40%DMEM +50%FBS+10%DMSO）；②含不同浓度DMSO配比分组：E组（55%DMEM +40%FBS+5%DMSO）、F组（50%DMEM+40%FBS+10%DMSO）、G组(45%DMEM +40%FBS+15%DMSO)、H组（40%DMEM +40%FBS+20%DMSO）。细胞冻存三个月后，对其进行复苏并观察细胞形态学变化；通过细胞计数计算细胞存活率；采用MTT法绘制复苏后细胞生长曲线，以测定其生长增殖情况。结果：细胞复苏后，通过细胞计数计算结果显示C、D组存活率明显高于A、B组(P＜0.05)，E、F、G、H四组之间有统计学意义(P＜0.01)；MTT法结果显示C、D、F组的增殖曲线与未冻存组无明显差异(P＞0.05)。结论：从兔脂肪组织中成功分离出了ADSCs，并且能在体外培养过程中稳定生长，快速增殖；ADSCs冻存液比例选择以DMEM：FBS：DMSO=5：4∶1的冻存效果最好。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨彪炳		41	129	7.0	8.0
2	阎贺		7	10	3.0	3.0
3	姚永明		9	15	3.0	3.0
4	张泽敏		8	14	3.0	3.0
5	牛常英		11	20	3.0	4.0
6	张帆		2	3	1.0	1.0
7	吴彩凤		2	6	2.0	2.0
8	胡飞		5	7	2.0	2.0