猪肾细胞源三种蛋白质对猪圆环病毒2型复制的调节作用

• 作者: 刘长明 危艳武 唐青海 张辉 黄立平
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 复制 AP2α2 Elf4 ISCU
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 2040-2049
• 页数: 10页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 5206字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.11.017

摘要

为了验证猪肾细胞系(PK-15)源3种蛋白质基因(AP2α2、Elf4和ISCU)表达水平对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的调节作用,采用RT-PCR扩增这3种蛋白质编码基因,构建真核表达载体;同时设计这3种蛋白质的RNAi片段,分别插入到pGPU6-GFP载体构建shRNA干扰载体.以荧光定量PCR法检测干扰效率,选取干扰效率较高的干扰载体,利用G418筛选转染真核表达载体或干扰载体后的PK-15细胞.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)法检测PCV2 LG毒株在这些细胞中的复制效率.结果表明,Elf4蛋白和ISCU蛋白基因过表达能够显著增强PCV2的复制;而AP2α2蛋白基因过表达对PCV2的复制无显著影响.AP2α2、ISCU和E1f4这3种蛋白质基因被干扰表达后均可降低PCV2复制效率,表明这3种宿主细胞蛋白质对该病毒复制具有调节作用.