猪圆环病毒2型重组腺病毒核酸扩增检测标准样品的研制

• 作者: 乔彩霞 刘环 张伟 张鹤晓 林祥超 蒲静 谷强 高志强
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 猪圆环病毒2型 ORF2 重组腺病毒 标准样品
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 10-12,16,中插1
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+1
• 语种: 中文

摘要

为研制用于猪圆环病毒2型(PCV-2)核酸扩增检测(NAT)质量控制的标准样品,本研究将猪圆环病毒2型QD/2014株ORF2连接到缺陷型腺病毒穿梭质粒pacAd5 CMV K-NpA上,构建了重组穿梭质粒CMV-PCV-2-ORF2.将其与骨架质粒pacAd5 9.2-100线性化后共转染HEK293T细胞,经胞内重组获得了内含PCV-2-ORF2的重组腺病毒pacAd5 CMV-ORF2.采用PCR和基因测序方法对重组病毒鉴定后进行大量培养、分装和冻干,经均匀性和稳定性检验后对其进行了定值.结果表明,制备的标准样品均匀、稳定,PCV-2-ORF2基因含量为8.17×109 GEq/mL,在HEK293细胞上的TCID50为3.56×107/0.05 mL.本标准样品的研制成功为核酸检测标准物质制备开辟了一条新途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘环		51	203	7.0	11.0
2	蒲静		34	111	6.0	8.0
3	张伟		48	119	7.0	8.0
4	高志强		48	143	7.0	9.0
5	张鹤晓		43	280	9.0	15.0
6	乔彩霞		27	128	7.0	9.0
7	谷强		31	138	6.0	11.0
8	林祥超	青岛农业大学动物科技学院	4	3	1.0	1.0