活血及活血解毒配伍中药含药血清对肿瘤坏死因子-α诱导人内皮细胞与中性粒细胞黏附及相关通路蛋白表达的影响

• 作者: 刘倩 史大卓 殷惠军 郭春雨 马晓娟
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 活血解毒 内皮细胞 细胞黏附 丝裂素活化蛋白激酶p38 细胞外信号调节激酶1/2
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 204-209
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/CJIM.2015.02.0204

摘要

目的 探讨活血及活血解毒配伍中药含药血清对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞(H UVECs)与外周血中性粒细胞(PMN)黏附、炎症反应及相关通路蛋白的影响.方法 采用随机数字表法将32只大鼠分为空白对照组、芎芍胶囊组、黄连胶囊组及芎芍胶囊加黄连胶囊组,每组8只,各给药组按临床等效剂量灌胃,采血制备含药血清.空白对照组予等体积蒸馏水作对照.常规方法培养HUVECs,以TNF-α(100 ng/mL)为刺激物,制备HUVECs细胞损伤模型.细胞分为5组:空白对照组、模型组、活血组、解毒组及活血解毒组.空白对照组及模型组给予正常大鼠血清,其他3组以10％含药血清干预24 h后收集细胞,应用孟加拉玫瑰红染色法观察HUVECs与PMN发生病理性黏附情况;酶联免疫法检测细胞上清液相关炎症因子E选择素(E-selectin)、细胞黏附分子-1(ICAM-1)及白细胞介素-1β(IL-1β)含量;Western blot法检测丝裂素活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)蛋白磷酸化水平.结果 与空白对照组比较,模型组细胞出现明显的氧化损伤,PMN黏附数量明显增加,IL-1β、E-selectin及ICAM-1水平升高,且HUVEC上清p-p38MAPK、p-ERK 1/2蛋白表达增加(均P＜0.01).与模型组比较,活血组、解毒组及活血解毒组HUVECs与PMN黏附数量减少(P＜0.05),细胞培养上清液IL-1β、E-selectin及ICAM-1水平降低(P ＜0.05,P＜0.01),且内皮细胞p-p38MAPK、p-ERK 1/2蛋白表达降低(P＜0.01).结论 活血及活血解毒含药血清能减轻TNF-α诱导的HUVECs损伤,抑制HUVECs-PMN黏附和黏附因子释放.其机制可能与调节内皮细胞MAPK通路p38MAPK、ERK 1/2蛋白磷酸化水平有关.