抗产气荚膜梭菌ε毒素Phage-ScFv库的构建、筛选与鉴定

• 作者: 刘思远 张聪敏 杜乐妍 王琳 赵宝华
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: D型产气荚膜梭菌 ε毒素 单链抗体 噬菌体抗体库 富集筛选
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 406-412
• 分类号: S856.25
• 语种: 中文

摘要

利用本实验室已诱导并纯化后的重组毒素蛋白制成类毒素免疫BALB/c小鼠,提取小鼠脾脏mRNA.通过RT-PCR和SOE-PCR获得由抗体重链可变区(VH)-Linker-轻链可变区(VL)构成的750 bp左右单链抗体(ScFv)基因片段.随后利用噬菌体展示技术成功构建了抗产气荚膜梭茵ε毒素噬菌体单链抗体(Phage-ScFv)库.并通过“吸附-洗脱-扩增”,5轮高效的淘洗筛选系统,最终筛选出特异性强的噬菌体抗体.最后,对强阳性的单链抗体侵染E.coli HB2151进行表达,SDs-PAGE结果显示其相对分子质量为30 000左右,与预期结果一致,并且能以分泌形式表达.本试验为抗产气荚膜梭菌ε毒素中毒治疗及其分子致病机制的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵宝华	河北师范大学生命科学学院	238	1801	20.0	28.0
2	张聪敏	河北师范大学生命科学学院	7	59	5.0	7.0
3	王琳	河北师范大学生命科学学院	20	90	7.0	9.0
4	刘思远	河北师范大学生命科学学院	6	9	2.0	2.0
5	杜乐妍	河北师范大学生命科学学院	6	19	1.0	4.0