microRNA－218在急性淋巴细胞白血病细胞CCRF－CEM中的作用及机制研究

• 作者: 倪红兵 吴尤佳 孙宝兰 宋红花 徐美玉 杨治平 金爱琴 顾健辉
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病 miR-218 增殖 凋亡 KIT
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 103-108
• 页数: 6页
• 分类号: R733.71
• 字数: 4930字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.01.022

摘要

目的：检测microRNA－218（ miR－218）在人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞（ CCRF－CEM）中的表达情况和其对细胞生物学特性的影响，并观察miR－218对靶基因c－kit表达的影响，为人白血病治疗提供新方法和新策略。方法：利用实时荧光定量PCR（ quantitative real－time PCR，qRT－PCR）检测miR－218在正常人外周血T淋巴细胞和CCRF－CEM中的表达情况。在CCRF－CEM细胞中转染miR－218 mimic后48 h，qRT－PCR检测CCRF－CEM细胞中miR－218表达变化；MTT检测miR－218对CCRF－CEM细胞活力的影响。流式细胞仪分析miR－218对细胞CCRF－CEM的细胞周期和凋亡的影响。利用荧光报告酶系统检验c－kit是miR－218调控靶基因，并采用Western blot方法检测miR－218对CCRF－CEM细胞中KIT蛋白表达的影响。结果：qRT－PCR检测结果显示：与正常人外周血T淋巴细胞相比，miR－218在CCRF－CEM细胞系中的表达显著下降（ P＜0．01）。与对照组相比，在CCRF－CEM中转染miR－218 mimic 48 h后，细胞中miR－218的表达显著上升（P＜0．01）。 MTT结果显示：在CCRF－CEM细胞中过表达miR－218后，细胞活力显著下降（ P＜0．05）。流式细胞仪分析结果显示：过表达miR－218后，miR－218 mimic转染组细胞的S期细胞比例明显下降（P＜0．01）；细胞的凋亡显著增加（P＜0．01）。荧光素酶报告基因系统检测结果显示：与对照组相比，转染miR－218 mimic组的相对荧光素酶活力显著降低（ P＜0．01）。 Western blot检测结果显示：与对照组相比，在CCRF－CEM中转染miR－218 mimic 48 h后，细胞中KIT蛋白的表达显著下降（ P＜0．01）。结论：miR－218在人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞（ CCRF－CEM）中表达下调，miR－218可负性调节KIT蛋白的表达，并抑制CCRF－CEM细胞增殖，促进凋亡。增强miR－218表达的治疗策略有望使白血病患者受益。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪红兵	南通大学附属医院儿科	41	141	7.0	9.0
2	顾健辉	南通大学附属医院儿科	47	141	6.0	9.0
3	徐美玉	南通大学附属医院儿科	90	458	11.0	15.0
4	吴尤佳	南通大学附属医院儿科	44	144	8.0	9.0
5	孙宝兰	南通大学附属医院儿科	35	126	7.0	8.0
6	宋红花	南通大学附属医院儿科	11	25	3.0	4.0
7	杨治平	南通大学附属医院儿科	5	11	2.0	3.0
8	金爱琴	南通大学附属医院儿科	3	16	2.0	3.0