卡拉霉素在转基因黄籽油菜中的应用

• 作者: 刘列钊 周清元 孙伟 李加纳 林呐 陈历晨
• 来源期刊: 西南大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 卡拉霉素 转基因黄籽油菜 抗性
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: ?农业科学?
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S634.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13718/j.cnki.xdzk.2015.11.001

摘要

为筛选出黄籽油菜遗传转化中卡拉霉素或卡拉霉素（kanamycin ，Kan or km ）最佳质量浓度，首先将油菜子叶接种在不同质量浓度Kan（0～180 mg／L）的分化培养基上，结果发现Kan质量浓度小于60 mg／L有利于绿苗分化。然后在不同质量浓度Kan的分化培养基上对农杆菌侵染的下胚轴进行筛选，结果表明初代培养Kan质量浓度以20～40 mg／L为宜，同样质量浓度继代培养后可获得抗性愈伤和转基因阳性苗。最后利用Kan抗性对转基因黄籽油菜后代进行研究，苗期到薹花期生长的植株进行叶片涂抹法筛选，Kan最适质量浓度为4 g／L ，时间为4～10 d；T1代抗性分析、GUS染色分析、T1代籽粒的PCR检测说明转基因在T1代、T2代可遗传并出现分离。β葡萄糖苷酸酶基因（GUS）和聚合酶链式反应（PCR）验证叶片涂抹进行Kan抗性筛选的方法准确性高，可达100％。