为满足疏水性离子液体 N-甲基-N-丁基吡咯烷双三氟甲烷磺酰亚胺盐([MBPy]Tf2 N)在甘草酸生物催化体系中分析检测的需要,研究了[MBPy]Tf2 N 的光谱特征,并考察了溶剂、醇-水混合溶剂和 pH 值对[MB-Py]Tf2 N 荧光特性的影响,建立了生物催化体系中[MBPy]Tf2 N 的荧光光谱检测方法.研究结果表明,[MB-Py]Tf2 N 在186 nm 处有1个最大吸收峰,常规紫外检测法不适于对其进行检测;[MBPy]Tf2 N 荧光光谱最大激发波长为228 nm,发射波长为340 nm,且其耐光褪色性良好,在水溶液中荧光量子产率为0.067,在醇-水混合溶剂中其荧光强度有增大趋势,在碱性介质中其荧光强度受影响较大;荧光光谱法检测[MBPy]Tf2 N 的检出限(S/ N =3)为1.00μg/ mL,标准曲线在5.00~1.25×103μg/ mL 浓度范围内线性关系良好( R2=0.9999),生物反应液中加标回收率为97.4%~107.4%(相对标准偏差 RSD=4.6%).