运用基因枪法进行蛹虫草遗传转化的研究

• 作者: 周陈力 李燕 汪滢 茅文俊 谭琦 鲍大鹏
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蛹虫草 基因枪 遗传转化 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1837-1842
• 分类号: S567|S646
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0145

摘要

采用蛹虫草[Cordyceps militaris (L.) Link]野生型菌株CM01为供试材料,以金粉包裹质粒pDHt-gpdA-GFP-bar,运用基因枪法转化,经草铵膦抗性筛选,最终在靶距离6 cm或9 cm,氦气压力7.58×106 Pa或8.96×106 Pa条件下,获得2个遗传稳定的转化子Gfp2与Gfp3,转化效率为0.4 efu·μg-1.PCR鉴定与Southern杂交分析显示,草铵膦抗性基因Bar已经以单拷贝或者多拷贝方式整合到蛹虫草转化子的基因组中.蛹虫草转化子的菌丝在荧光显微镜下可以观测到绿色荧光,表明载体携带的绿色荧光蛋白基因在蛹虫草转化子中得到表达.研究结果表明可以把基因枪法应用于真菌蛹虫草,建立了一种简便有效的遗传转化方法,而转化效率需要通过优化基因枪参数设置、受体材料制备等途径进一步提高.