人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞分选及三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因表达水平

• 作者: 冯淑曼 刘秋荣 刘秋雨 孙文聪 李文涛 王冰 王磊 邓萌 黄毅
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 多西他赛 耐药 乳腺癌干细胞
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 495-498
• 页数: 4页
• 字数: 3698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.03.020

摘要

目的 分选人乳腺癌多西他赛(Docetaxel)耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,探讨其生物学特征.方法 采用悬浮培养联合多西他赛法分选耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,采用悬浮培养法富集BT549、BT549/Docetaxel干细胞,进行CD44、CD24细胞标记和流式细胞仪检测,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BT549、BT549/Docetaxel干细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ABCG2)基因表达.结果 BT549/Docetaxel与BT549干细胞的群体倍增时间分别为(39.22 ±0.65)、(29.20 ±0.50)h,差异有统计学意义(P＜0.05).流式分析显示,BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(13.8±0.5)％,高于单层培养BT549细胞的比例(2.8±0.6)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例为(19.1±0.3)％,高于单层培养BT549/Docetaxel细胞的比例(5.0±0.4)％(P＜0.01).BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44+/CD24-/low比例高于BT549微球体细胞的CD44 +/CD24-/low比例,差异有统计学意义(P＜0.05).BT549干细胞内药物的含量为(46.9 ±0.5)ng/106个细胞,BT549/Docetaxel干细胞内药物的含量为(7.1±0.3)ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).正常培养基培养4h后,BT549细胞内药物的含量为(28.3±0.6) ng/106个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量(3.5±0.1) ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).ABCG2的mRNA在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显高于在BT549干细胞内中的表达,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 成功筛选人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,生长及耐药性稳定.ABCG2基因在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显增高.