miR-210 促进人牙周膜干细胞血管向分化作用的初步研究

• 作者: 古月 王银龙
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 牙周膜干细胞 miR-210 低氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1381-1385
• 页数: 5页
• 分类号: Q782|Q342
• 字数: 3716字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建miR-210 的慢病毒载体 ( Lenti-miR-210-Luciferase) ,转染人牙周膜干细胞 ( hPDLSCs)后,检测成血管因子低氧诱导因子-1α ( HIF-1α)及血管内皮生长因子( VEGF)在 hPDLSCs 的表达. 方法 分离培养hPDLSCs,并根据人miR-210 基因(NC_000011. 9)序列行引物设计及序列片段的 PCR 扩增,将目的基因 PCR 产物连接到载体pLVX-EGFP-3FLAG-EF1-Luc上. 将目的基因 PCR 产物和目的载体用 EcoR Ⅰ和 Xba Ⅰ分别进行酶切,对质粒进行鉴定. 采用LR重组系统构建慢病毒载体Lenti-miR-210-Lucif-erase ( Lenti-LacZ-Luciferase为对照组). 转染 hPDLSCs后,通过qPCR和免疫组化法检测HIF-1α及VEGF 的表达. 结果 通过对构建质粒克隆进行测序及酶切,证实Lenti-miR-210-Luciferase构建成功. Lenti-miR-210-Luciferase 转染 hP-DLSCs,0、1、4、7、14 d 后行 qPCR 检测,结果表明第 4 天HIF-1α 和 VEGF 明显过表达,且持续到第14天. 免疫组化结果显示,miR-210 转染 hPDLSCs 后,抗 HIF-1α和抗 VEGF染色呈阳性,对照组呈阴性. 结论 成功构建了慢病毒载体Lenti-miR-210-Luciferase,并且 miR-210 具有促进 hPDLSCs血管向分化的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王银龙	安徽医科大学附属口腔医院口腔颌面外科	52	236	7.0	12.0
2	古月	安徽医科大学附属口腔医院口腔颌面外科	1	2	1.0	1.0