鸡chUSP1 His594Ala突变使其去泛素化酶活性丧失

• 作者: 于佩峰 吕岩 吴山力 王梦云 艾永兴 赵程程 邓晨 郑海南
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: chUSP1 杆状病毒 昆虫细胞 酶活性分析
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 745-750
• 分类号: S831
• 语种: 中文

摘要

泛素特异性蛋白酶1 (ubiquitin-specific proteases 1,USP1)是一种去泛素化酶,它在DNA损伤修复应答过程中发挥重要功能.已证明USP1与UAF1(USP1-associated factor 1)形成复合物后,其酶活性会得到极大的提升.chUSP1为在鸡细胞中发现的一种去泛素化酶,生物信息学分析发现它与人USP1同源性高达72％.本研究以本室扩增的chUSP1基因和chUAF1基因,使用bac-to-bac系统表达了chUSP1GG680,681AA单体及chUSP1G G680681AA/chUAF1复合体.并根据人USP1预测将chUSP1一个可能的活性中心位点第594位组氨酸突变为丙氨酸,并纯化了此突变型的单体和复合体.应用底物Di-Ub/Ub2 WT Chains (K63-linked)及Di-Ub/Ub2 WT Chains(K48-linked)对chUSP1GG680,681AA和突变型chUSP1 HGG594,680,681AA进行酶活性分析.试验结果表明chUSP1具有切割Ub链底物的酶活性,且第594位组氨酸残基突变影响chUSP1的去泛素化酶活性.而chUAF1可以与chUSP1相互作用形成复合体,并且明显提高chUSP1酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	艾永兴	吉林大学动物科学学院	23	41	4.0	5.0
2	赵程程	吉林大学动物科学学院	5	17	2.0	4.0
3	郑海南	吉林大学动物科学学院	9	17	3.0	3.0
4	吴山力	吉林大学白求恩医学学院	21	120	6.0	10.0
5	吕岩	吉林大学动物科学学院	49	90	6.0	6.0
6	邓晨	吉林大学动物科学学院	8	20	3.0	4.0
7	于佩峰	吉林大学动物科学学院	5	9	2.0	3.0
8	王梦云	吉林大学动物科学学院	9	16	3.0	3.0