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人泛素结合酶UbcH5c活性突变体的构建·纯化以及催化活性研究
人泛素结合酶UbcH5c活性突变体的构建·纯化以及催化活性研究
作者:
张西轩
李晔
阮海华
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
UbcH5c
泛素化修饰
点突变
摘要:
[目的]构建人泛素结合酶UbcH5c的活性位点突变体S22R和F62A,同时分析这2种突变体蛋白与野生型蛋白在泛素化反应中的活性差异.[方法]通过点突变(Site-Directed Mutagenesis)的方法构建2种突变体质粒,利用0.5 mmol/L IPTG分别诱导2种突变体蛋白在大肠杆菌中进行表达;将菌体超声破碎后,依次利用阳离子交换层析法对UbcH5c突变蛋白进行分离纯化,最后利用体外泛素化酶促反应结合蛋白免疫印迹杂交的方法分析野生型UbcH5c与其活性突变体UbcH5c S22R和UbcH5c F62A在泛素化修饰上的差异.[结果]人泛素结合酶UbcH5c的2个突变体蛋白S22R、F62A的泛素化修饰程度明显弱于野生型蛋白.[结论]突变体S22R和F62A突变均不同程度的改变了人泛素结合酶UbcH5c与泛素分子之间的结合活性,即2个突变的位点中第62位苯丙氨酸残基及第22位丝氨酸残基均是UbcH5c结合泛素的关键位点,而且后者对于UbcH5c结合泛素活性的影响更大.
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文献信息
篇名
人泛素结合酶UbcH5c活性突变体的构建·纯化以及催化活性研究
来源期刊
安徽农业科学
学科
农学
关键词
UbcH5c
泛素化修饰
点突变
年,卷(期)
2014,(3)
所属期刊栏目
生物技术
研究方向
页码范围
663-666
页数
4页
分类号
S188
字数
3729字
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
李晔
天津市食品生物技术重点实验室生物技术与食品科学学院
3
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2
张西轩
天津市食品生物技术重点实验室生物技术与食品科学学院
3
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阮海华
天津市食品生物技术重点实验室生物技术与食品科学学院
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节点文献
UbcH5c
泛素化修饰
点突变
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
安徽农业科学
主办单位:
安徽省农业科学院
出版周期:
半月刊
ISSN:
0517-6611
CN:
34-1076/S
开本:
大16开
出版地:
安徽省合肥市农科南路40号
邮发代号:
26-20
创刊时间:
1961
语种:
chi
出版文献量(篇)
78281
总下载数(次)
236
总被引数(次)
436536
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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