人诱导性多潜能干细胞系的建立

• 作者: 师迎旭 杜华 谢印良 韩艳秋
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 人诱导性多潜能干细胞 人胚胎干细胞 畸胎瘤 三胚层分化 Oct4 Sox2 c-Myc Klf-4
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 868-875
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8543字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344

摘要

背景：诱导性多潜能干细胞与肿瘤干细胞的发生过程极其相似，而且具有的干细胞特性极其接近人胚胎干细胞。因此，研究诱导性多潜能干细胞有利于人们进一步认识并了解人类发育以及肿瘤的发生过程。目的：掌握建立人诱导性多潜能干细胞系的技术，以便为特异性疾病细胞的重编程建立技术平台，从而利用重编程技术研究疾病的发病机制。方法：将含有Oct4、Sox2、Klf-4和c-Myc 4个转录因子的反转录病毒感染人皮肤成纤维细胞(HS27细胞)，在人胚胎干细胞培养条件下诱导产生人胚胎干细胞样的克隆。挑取并进一步扩增，通过克隆形态、碱性磷酸酶活性、免疫荧光检测是否有人胚胎干细胞标记物Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4的表达，悬滴法检测HS27细胞来源的克隆形成畸胎瘤的能力和验证向3个胚层的分化能力。结果与结论：经病毒感染诱导产生的胚胎干细胞样克隆呈绿色荧光蛋白阴性，克隆在细胞形态方面与人胚胎干细胞克隆相似，进一步扩增经碱性磷酸酶检测克隆呈阳性，免疫荧光检测克隆表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4，并且 HS27细胞来源的克隆注入免疫缺陷小鼠体内可以形成畸胎瘤并经苏木精-伊红染色显示具有向三胚层分化能力。实验成功构建了人诱导性多潜能干细胞系，为下一步开展疾病细胞特异性重编程研究奠定了良好的实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩艳秋	内蒙古医科大学附属医院检验科	85	364	10.0	15.0
2	杜华	内蒙古医科大学基础医学院病理解剖教研室	29	123	5.0	10.0
3	师迎旭	内蒙古医科大学附属医院检验科	22	71	5.0	7.0
4	谢印良	内蒙古医科大学基础医学院病理解剖教研室	1	3	1.0	1.0