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摘要:
为获得高浓度、高质量的有效原核表达蛋白作为 ELISA诊断抗原,通过 RT-PCR法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JL-04/12株的核衣壳蛋白(N蛋白)基因并克隆到原核表达载体 pGEX-6P-1中,转入到大肠埃希菌BL-21感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过温度和IPTG浓度的优化,进行重组蛋白的高效表达,经SDS-PAGE和 Western blot对表达产物的特性进行分析,利用 GST柱纯化表达蛋白,并免疫小鼠,ELISA检测其刺激产生抗体的能力-抗原的免疫原性。结果表明,0.1 mmol/L的 IPTG、28℃诱导4 h可高效诱导重组蛋白的表达,在表达上清中目的蛋白达40%,原核表达的重组N蛋白可诱导小鼠产生抗体,抗体效价为1∶256。原核表达的N蛋白与PRRSV具有相同的抗原性。
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篇名 高致病性PRRSV JL-04/12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析
来源期刊 动物医学进展 学科 农学
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 核衣壳蛋白 原核表达 纯化
年,卷(期) 2015,(10) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 60-63,64
页数 5页 分类号 S852.659.6
字数 3696字 语种 中文
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猪繁殖与呼吸综合征病毒
核衣壳蛋白
原核表达
纯化
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
动物医学进展
月刊
1007-5038
61-1306/S
大16开
陕西杨陵西北农林科技大学动物医学院
52-60
1980
chi
出版文献量(篇)
7631
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22
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56446
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