鸡柔嫩艾美耳球虫特异性抗体EtMIC4-N蛋白BAS-ELISA检测方法的建立

• 作者: 刘新月 安健 宋丽聪 张建军 王黎霞 赵晨璐
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 柔嫩艾美耳球虫 特异性抗体 EtMIC4-N蛋白 BAS-ELISA
• 年，卷（期）: 2015,（14）
• 所属期刊栏目: 畜牧·动物医学·蚕·蜂
• 页码范围: 44-50
• 分类号: S831.7
• 语种: 中文

摘要

为了检测柔嫩艾美耳球虫感染鸡血清中特异性抗体水平,原核表达纯化EtMIC4-N蛋白,采用免疫印迹法确定其反应原性,再以纯化后的蛋白为包被抗原,以生物素标记的羊抗鸡IgG为二抗,以RP结合链霉亲和素为酶标抗体,建立了检测柔嫩艾美耳球虫抗体的BAS-ELISA方法.经检测,EtMIC4-N蛋白最佳包被浓度为7μgmL,最适封闭液为1％ BSA,最佳血清稀释度为1:80,二抗稀释度为1:100000,酶标抗体稀释度为1:100000,最适显色时间为15min,组内和组间变异系数均小于10％.通过动物感染试验验证,结果表明建立的BAS-ELISA可以用于检测柔嫩艾美耳球虫特异性抗体的检测,并且具有简便,快速,灵敏,成本低等特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王黎霞	北京农业职业学院畜牧兽医系	33	68	5.0	6.0
2	安健	北京农学院动物科学技术学院	63	446	10.0	18.0
3	张建军	北京农学院动物科学技术学院	21	37	4.0	5.0
4	宋丽聪	北京农学院动物科学技术学院	6	8	1.0	2.0
5	刘新月	北京农学院动物科学技术学院	3	7	1.0	2.0
6	赵晨璐	北京农学院动物科学技术学院	5	8	1.0	2.0