人膀胱癌顺铂耐药细胞株T24/CDDP的建立和鉴定及耐药机制研究

• 作者: 严泽军 周成 夏术阶 程跃 蒋军辉 谢国海 钱君海 陆琴琴
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 关键词: 膀胱肿瘤/药物疗法 顺铂/治疗应用 抗药性,肿瘤
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1623-1627
• 页数: 5页
• 字数: 3715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2015.11.008

摘要

目的 建立人膀胱癌顺铂(CDDP)耐药细胞株T24/CDDP,鉴定其生物学特性,并探讨其对CDDP耐药的机制.方法 采用CDDP浓度逐步递增联合大剂量CDDP冲击方法,在体外连续诱导、培养膀胱癌细胞株124细胞,建立对CDDP耐药的细胞株T24/CDDP.CCK-8法测定T24/CD-DP细胞对CDDP的耐药指数;绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间;流式细胞术检测T24细胞和124/CDDP细胞的细胞周期比例;Western blot测定细胞中蛋白激酶Cα(PKCα)和P-糖蛋白(P-gp)蛋白的表达.结果 124细胞在体外采用CDDP浓度逐步递增联合大剂量CDDP冲击方法连续诱导、培养,历时11个月,成功建立了对CDDP耐药的细胞株T24/CDDP,其耐药指数为4.17.T24细胞和T24/CDDP细胞的群体倍增时间分别为(33.61±0.41)h和(39.94 ±0.63)h,两者比较差异有统计学意义(t=14.59,P=0.00).与124细胞相比,T24/CDDP细胞的S期细胞比例减少[(30.63±2.74)％ vs (35.38±3.31)％],但差异无统计学意义(P＞0.05).G0/G1期细胞比例增加[(60.42±3.25)％ vs (47.25±4.17)％],G2/M期细胞比例减少[(8.95±2.81)％ vs (17.37±3.46)％],差异均有统计学意义(t=4.31,P=0.006;t=3.27,P=0.015).T24细胞和124/CD-DP细胞中均有PKCα和P-gp蛋白的表达.与T24细胞相比较,124/CDDP细胞中PKCα和P-gp蛋白表达水平均显著升高[(3.12±0.11)vs (1.37±0.06),t=24.19,P=0.00;(1.98±0.08) vs(0.47±0.03),t=30.61,P=0.00].结论 T24/CDDP细胞具有耐药表型及耐药细胞的生物学特性,其耐药机制可能与细胞中PKCα和P-gp蛋白的过度表达有关.