黄芪甲苷与三七有效成分配伍对小鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和内质网应激的影响

• 作者: 丁煌 唐映红 欧阳国 邓常清 黄小平
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 黄芪甲苷 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 三七皂苷R1 配伍 脑缺血再灌注 神经细胞凋亡 内质网应激
• 年，卷（期）: 2015,（15）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 2257-2264
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.15.014

摘要

目的 从内质网应激角度探讨黄芪甲苷和三七主要有效成分配伍对小鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响和作用机制.方法 将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲苷(AST Ⅳ,40 mg/kg)组、人参皂苷Rg1(Rg1,50 mg/kg))组、人参皂苷Rb1(Rb1,40 mg/kg)组、三七皂苷R1(R1,10 mg/kg)组、4种有效成分配伍(AST Ⅳ+Rg1 +Rb1 +R1)组、AST Ⅳ+Rg1组、AST Ⅳ+Rb1组、AST Ⅳ+R1组及阳性对照依达拉奉组.各组小鼠预先给药3d后,夹闭双侧颈总动脉造成脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后,TUNEL法检测海马CA1区神经细胞凋亡,计算凋亡率;Western-blotting法测定脑组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3 (Caspase-3)、葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、Caspase-12和磷酸化的c-jun氨基末端激酶1/2(p-JNK1/2)蛋白表达.结果 脑缺血20 min再灌注24h后,小鼠海马CA1区神经细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量增加.各给药组均能降低海马CA1区神经细胞凋亡率,抑制Caspase-3蛋白的表达.且AST Ⅳ+Rg1与AST Ⅳ+R1降低凋亡率和Caspase-3蛋白表达的效应分别强于各有效成分单用;4种有效成分配伍降低细胞凋亡率的效应强于各有效成分单用及AST Ⅳ+Rb1,抑制Caspase-3蛋白表达的效应强于各有效成分单用及AST Ⅳ+Rb1、AST Ⅳ+R1.脑缺血再灌注后,小鼠脑组织GRP78和Caspase-12、p-JNK1/2蛋白表达增多,AST Ⅳ、Rg1、R1及各配伍组均能进一步上调脑组织GRP78蛋白表达,且各有效成分配伍的效应分别强于各有效成分单用,4种有效成分配伍的效应强于AST Ⅳ+ Rb1及AST Ⅳ+R1.R1、4种有效成分配伍、AST Ⅳ+Rg1、AST Ⅳ+R1均能降低Caspase-12蛋白的表达,4种有效成分配伍的效应强于各有效成分单用及AST Ⅳ+ Rb1.ASTⅣ、Rg1、4种有效成分配伍、AST Ⅳ+Rg1、AST Ⅳ+Rb1组脑组织p-JNK1/2蛋白表达显著减少,4种有效成分配伍下调p-JNK1/2的效应强于各有效成分单用及AST Ⅳ+Rg1、AST Ⅳ+R1.结论 黄芪甲苷与三七的主要有效成分配伍能增强对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的抑制作用,其机制与通过不同环节减轻内质网应激有关.AST Ⅳ+Rb1可能主要作用于JNK通路,AST Ⅳ+R1可能主要作用于Caspase-12通路,而4种有效成分配伍和AST Ⅳ+Rg1均能作用于Caspase-12和JNK通路.