目的:探讨不同细胞外硬度凝胶基质对成骨细胞M C3 T 3‐E1形态、增殖以及矿化能力的影响。方法:通过调整丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺单体的相对浓度,制备出硬凝胶基质(交联度16%,杨氏模量为25 kPa)和软凝胶基质(交联度5%,杨氏模量为5 kPa)。用不同硬度的细胞外凝胶基质来培养成骨样细胞MC3T3‐E1细胞,分别采用免疫荧光、MTT 比色以及茜素红染色等方法研究不同硬度的凝胶基质对细胞形态、增殖以及矿化等功能的影响。结果:MTT 比色法检测结果显示聚丙烯酰胺凝胶浸提液对成骨细胞MC3T3‐E1的活性均无影响,生物相容性好。MC3T3‐E1细胞形态随着细胞外凝胶基质硬度的降低,其形状由从梭形向长条形变化。细胞外硬凝胶基质和软凝胶基质上培养的细胞,铺展面积具有显著性差异(P<0.01)。随着培养基质硬度的降低, M C3 T 3‐E1细胞的增殖受到抑制;在硬基质表面培养的细胞,经矿化诱导后染色,钙结节明显可见;在细胞外软基质表面培养的细胞,经矿化诱导后染色,无明显的钙结节出现(P<0.01)。结论:细胞外软凝胶基质对成骨样细胞M C3 T 3‐E1铺展、增殖和矿化具有抑制作用,提示力学刺激减少不利于成骨细胞生长。