微小RNA-224靶向Tribbles同源蛋白1调控前列腺癌细胞DU145的迁移和侵袭

• 作者: 吴永定 宋胜达 朱学进 林卓远 梁应科 董卫民 蔡志煅 钟惟德 韩兆冬
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 微小RNA-224 前列腺癌 细胞迁移 细胞侵袭 Tribbles同源蛋白1
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 泌尿外科
• 页码范围: 2939-2942
• 页数: 4页
• 字数: 4033字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.12.007

摘要

目的 观察微小RNA-224 (miR-224)对前列腺癌细胞DU145迁移和侵袭能力的影响以及对靶基因Tribbles同源蛋白1(TRIB1)表达的影响.方法 通过慢病毒转染前列腺癌细胞株DU145使其过表达miR-224,利用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测细胞TRIB1表达水平的变化,并通过荧光素酶实验验证miR-224与TRIB1基因的直接调控关系.设计拯救实验并重新利用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭.结果 划痕实验24h后DU145-224和DU 145-vector组细胞的迁移细胞数目分别为(103.2±20.6)、(189.8±34.7)个,miR-224过表达组细胞迁移能力明显下降(P＜0.01);Transwell细胞侵袭实验显示,DU145-224组和DU145-vector组细胞分别为(140.8±13.1)、(283.4±15.4)个,组间差异均有统计学意义(P＜0.01).过表达miR-224后,DU145细胞TRIB1的蛋白表达下调(P＜0.05).荧光素酶报告实验结果显示实验组荧光素酶活性值为0.42±0.06,比对照组(0.97±0.09)显著降低(P＜0.01),提示miR-224能明显抑制TRIB1-3'端非编码区域(3'-UTR)的荧光素酶活性.拯救实验结果表明在miR-224过表达的DU145细胞中进一步转入高表达TRIB1质粒后,迁移细胞数目为(203.2 ±31.2)个、侵袭细胞数目为(328.6 ±25.9)个,对比单纯miR-224过表达DU145细胞[迁移细胞数目为(73.2±17.8)个;侵袭细胞数目为(101.2±13.1)个],迁移和侵袭能力增强,组间差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 过表达miR-224可能通过靶向降低TRIB1基因的蛋白表达,抑制前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴永定	广州医科大学公共卫生学院	8	18	4.0	4.0
2	韩兆冬	广州市第一人民医院泌尿外科	13	54	3.0	6.0
6	林卓远	广州市第一人民医院中心实验室	3	9	2.0	3.0
7	梁应科	广州市第一人民医院中心实验室	1	4	1.0	1.0
8	蔡志煅	广州市第一人民医院中心实验室	4	10	2.0	3.0
9	宋胜达	广州市第一人民医院中心实验室	1	4	1.0	1.0
10	朱学进	广州市第一人民医院中心实验室	1	4	1.0	1.0
11	董卫民	广州市第一人民医院中心实验室	1	4	1.0	1.0