Hsa－miR－218靶向调控 LASP1对宫颈癌 HeLa 细胞生长的影响

• 作者: 何金花 周勤仙 王欢 石回刚 邱瑜 黄建平
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人微小RNA-218 LIM和SH3蛋白1 宫颈癌 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: ? 论 著?
• 页码范围: 1572-1577
• 页数: 6页
• 分类号: R730.23
• 字数: 4607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.09.007

摘要

目的：探讨人微小RNA－218（Homo sapiens microRNA－218， hsa－miR－218）对宫颈癌HeLa细胞生长的影响及分子机制。方法：构建hsa－miR－218的重组慢病毒表达载体pmiR－218，并将pmiR－218感染至HeLa细胞，台盼蓝拒染法检测细胞数量的变化，WST－8法检测细胞活力，构建萤光素酶报告基因载体验证miR－218与LIM和SH3蛋白1（LASP1）的相互结合作用，real－time PCR检测LASP1的mRNA相对表达水平，Western blot 检测LASP1蛋白的表达水平。结果：经DNA测序证实与设计完全一致，测序结果显示成功构建了重组慢病毒表达载体pmiR－218。 pmiR－218转染HeLa细胞72 h后HeLa细胞存活数量为176±9，对HeLa细胞活力的抑制率具有时间效应关系，较空白对照组比较，差异显著（P＜0．05）；萤光素酶活性结果显示，克隆LASP1－3’UTR的质粒与miR－218 mimics共转染293T细胞，引起萤光素酶活性的减低；real－time PCR 结果显示转染pmiR－218后，miR－218表达水平增加；过表达miR－128能下调LASP1 mRNA及蛋白的相对表达水平，与空白对照组及阴性对照组比较，差异显著（ P＜0．01）。结论：pmiR－218有效抑制HeLa细胞的生长，并具有时间－效应关系，其机制可能是miR－218通过靶向结合LASP1的3’UTR，从而下调其在HeLa细胞的表达有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周勤仙	吉安市妇幼保健院妇产科	8	39	4.0	6.0
2	黄建平	吉安市妇幼保健院妇产科	8	99	5.0	8.0
3	何金花	广州市番禺区中心医院检验科	32	77	5.0	7.0
4	邱瑜	吉安市妇幼保健院妇产科	7	83	2.0	7.0
5	王欢	吉安市妇幼保健院妇产科	3	15	2.0	3.0
6	石回刚		1	9	1.0	1.0