上调N-myc下游调节基因1表达对胰腺癌细胞增殖及凋亡的作用

• 作者: 张小薄 杨一帆 王怀涛 石刚 谭晓冬
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: N-myc下游调节基因1 胰腺癌 凋亡 细胞周期
• 年，卷（期）: 2015,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: R735.9
• 字数: 4222字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察磷酸化增强型绿色荧光蛋白-N-myc下游调节基因N3(pEGFP-NDRG1-N3)上调N-myc下游调节基因1(NDRG1)表达的胰腺癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响并探讨其机制.方法 以Westernblot法对PANC-1、BXPC-3、CAPAN-2、SW1990细胞中NDRG1表达进行检测;构建过表达质粒pEGFP-NDRG1-N3转染CAPAN-2细胞,以免疫荧光、Western blot法及实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上调效率;采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测转染后细胞增殖;碘化丙啶(PI)法检测细胞周期;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 Western blot显示,NDRG1在4组细胞株中均有表达,而在低分化细胞(PANC-1)中的表达量要高于中分化(BXPC-3)及高分化细胞株(CAPAN-2、SW1990)(P＜0.05);免疫荧光显示,pEGFP-NDRG1-N3组荧光细胞数占总细胞数＞70％,NDRG1在蛋白及mRNA水平表达上调;在mRNA水平,NDRG1表达上调后Parp、Cleaved Parp、p-P53、Cleaved-Capase3无改变(t=1.456、1.164、2.914和1.075,P＞0.05).在蛋白水平,Parp表达下调,Cleaved Parp表达上调,p-P53下调,Cleaved-Capase3下调(t=6.104、12.273、3.691和14.227,P ＜0.05);MTT显示,在96和120 h与pEGFP-N3组比较,pEGFP-NDRG1-N3转染后CAPAN-2细胞增殖能力增强(t =8.176和2.246,P＜0.05);PI法显示,转染pEGFP-NDRG1-N3的CAPAN-2细胞停留在G1期比例增高,G2及S期比例减少,与pEGFP-N3组比较,差异有统计学意义(t=3.651、4.133和3.092,P ＜0.05);pEGFP-NDRG1-N3凋亡低于pEGFP-N3组,差异有统计学意义(t=9.161,P＜0.01).结论 胰腺癌细胞NDRG1表达上调促进胰腺癌细胞增殖,抑制凋亡,促进细胞进入G1期,可作为胰腺癌治疗新的靶向候选基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王怀涛	中国医科大学附属盛京医院普通外科	14	16	2.0	3.0
2	谭晓冬	中国医科大学附属盛京医院普通外科	26	41	4.0	5.0
3	张小薄	中国医科大学附属盛京医院普通外科	32	92	5.0	8.0
4	石刚	辽宁省肿瘤医院大肠外科	10	40	2.0	6.0
5	杨一帆	中国医科大学附属盛京医院普通外科	4	1	1.0	1.0