人红细胞生成素对高糖诱导肾近曲小管上皮细胞转分化过程中炎性因子的影响及其可能机制

• 作者: 吴险峰 房向东 杨丽萍 涂卫平 秦晓华 陈艳霞 黄翀
• 来源期刊: 中国全科医学
• 关键词: 糖尿病肾病 红细胞生成素 细胞转分化 白细胞介素6 肿瘤坏死因子α RhoA/ROCK信号通路
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 论 著 Original Research
• 页码范围: 2433-2438
• 页数: 6页
• 分类号: R587.24
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.20.018

摘要

目的：探讨重组人红细胞生成素（ rhEPO）对高糖诱导的正常人肾小管上皮细胞（ HK-2细胞）转分化过程中炎性因子的变化及其可能机制。方法体外培养HK-2细胞，采用随机数字表法分为空白对照组（未加任何刺激物）、高糖诱导组（高糖终浓度为30 mmol/L）、甘露醇对照组（甘露醇为24.5 mmol/L）、rhEPO对照组（ rhEPO终浓度为20 U/ml ）、不同浓度 rhEPO 干预组（ rhEPO 终浓度分别为5、10、20 U/ml +高糖）及 Rho 激酶抑制剂（Y27632）组（Y27632终浓度为30μmol/L，加入Y2763230 min后加高糖，高糖终浓度为30 mmol/L），以上各组均培养24 h。采用RT-PCR检测各组细胞RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平；采用细胞免疫荧光法检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平；采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测人纤维连接蛋白（FN）、白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的蛋白表达水平。结果各组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；其中高糖诱导组与5 U/ml rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达均高于空白对照组，10 U/ml rhEPO组、20 U/ml rhEPO组及Rho激酶抑制剂组RhoA、ROCK1 mRNA表达均低于空白对照组（P<0.05）；不同浓度rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达均低于高糖诱导组（P<0.05），Rho激酶抑制剂组ROCK1 mRNA表达低于高糖诱导组（ P<0.05）；10 U/ml rhEPO组与20 U/ml rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达均低于5 U/ml rhEPO组（P<0.05）；20 U/ml rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达均低于10 U/ml rhEPO组（P<0.05）。各组α-SMA、E-cadherin、FN、IL-6及TNF-α蛋白表达比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；其中高糖诱导组、不同浓度rhEPO组、Rho激酶抑制剂组α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表达均高于空白对照组， E-cadherin均低于空白对照组（ P<0.05）；不同浓度rhEPO组、Rho激酶抑制剂组α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表达均低于高糖诱导组，E-cadherin均高于高糖诱导组（P<0.05）；10 U/ml rhEPO组、20 U/ml rhEPO组α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表达均低于5 U/ml rhEPO组，E-cadherin均高于5 U/ml rhEPO组（P<0.05）；Rho激酶抑制剂组α-SMA、FN蛋白表达均低于5 U/ml rhEPO组，E-cadherin均高于5 U/ml rhEPO组（P<0.05）；20 U/ml rhEPO组α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表达均低于10 U/ml rhEPO组，E-cadherin均高于10 U/ml rhEPO组（P<0.05）；Rho激酶抑制剂组α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表达均低于10 U/ml rhEPO组（P<0.05）。Pearson直线相关结果分析，高糖诱导组、不同浓度rhEPO干预组RhoA mRNA与ROCK1 mRNA表达水平呈正相关（ r=0.885、0.901、0.886、0.868，P<0.05）。结论 rhEPO可抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化，rhEPO还可以通过减少炎性因子的产生，减轻炎性反应，从而延缓糖尿病肾病（ DN）的进展，延缓肾间质纤维化，其机制可能与RhoA/ROCK信号通路有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄翀	南昌大学第二附属医院肾内科	25	52	4.0	4.0
2	房向东	南昌大学第二附属医院肾内科	68	432	11.0	18.0
3	涂卫平	南昌大学第二附属医院肾内科	70	468	11.0	18.0
4	秦晓华	南昌大学第二附属医院肾内科	35	153	6.0	10.0
5	杨丽萍		20	82	5.0	8.0
6	陈艳霞	南昌大学第二附属医院肾内科	17	118	5.0	10.0
7	吴险峰	南昌大学第二附属医院肾内科	14	59	3.0	7.0