垂体腺苷酸环化酶激活肽拮抗lactacystin细胞毒性的作用

• 作者: 于国平 冀永强 巴茂文 李宁 牟贤玉 管丽娜 连培文
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 帕金森病 PACAP lactacystin 内质网应激 细胞毒性 细胞保护 细胞形态 细胞活力 caspase-12 山东省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2015,（46）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 7461-7465
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.46.016

摘要

背景：帕金森病的发病机制未明确，目前尚没有有效的治疗方法能从根本上阻止其病程进展。目的：分析垂体腺苷酸环化酶激活肽对lactacystin诱导的帕金森病多巴胺能PC12细胞凋亡的影响及其分子机制。方法：用神经生长因子将 PC12细胞诱导分化成神经元的细胞模型，经不同浓度泛素-蛋白酶体抑制剂lactacystin处理，分别作用不同时间，取细胞存活约为50%的lactacystin作用浓度与时间，建立帕金森病细胞实验模型。实验分组：对照组、lactacystin组、垂体腺苷酸环化酶激活肽1-27干预组(干预1组)、垂体腺苷酸环化酶激活肽1-27和垂体腺苷酸环化酶激活肽6-27共同干预组(干预2组)。观察各组细胞形态变化；MTT法检测细胞活力；免疫印迹(Western blot)法检测内质网应激特异性蛋白caspase-12的表达情况。并观察垂体腺苷酸环化酶激活肽1-26及垂体腺苷酸环化酶激活肽6-27对lactacystin毒性作用的影响。结果与结论：不同浓度及作用时间的 lactacystin 处理 PC12细胞后，细胞活力呈浓度及时间依赖性下降，其中lactacystin 20μmol/L作用24 h使细胞活力下降约50%。在相同的lactacystin作用条件下(20μmol/L，24 h)，与对照组比较，lactacystin组细胞发生损伤性改变，细胞活力降低，caspase-12活性明显升高(P<0.01)；与lactacystin 组比较，干预1组细胞损伤性改变明显好转，细胞活力增强，下调凋亡蛋白 caspase-12的表达(P <0.01)。干预2组细胞状态则明显不如干预1组，与lactacystin组相差不大。结果提示泛素-蛋白酶体抑制剂lactacystin引起内质网应激导致细胞损伤；垂体腺苷酸环化酶激活肽1-27通过调节上述信号通路发挥保护作用。而作为垂体腺苷酸环化酶激活肽1-27的受体拮抗剂，垂体腺苷酸环化酶激活肽6-27则减弱了垂体腺苷酸环化酶激活肽1-27的这一作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	连培文	烟台毓璜顶医院中心实验室	5	3	1.0	1.0
2	于国平	烟台毓璜顶医院神经内科	12	36	4.0	5.0
3	李宁	烟台毓璜顶医院中心实验室	10	12	2.0	3.0
4	巴茂文	烟台毓璜顶医院神经内科	12	47	3.0	6.0
5	管丽娜	烟台毓璜顶医院急诊科	2	2	1.0	1.0
6	冀永强	烟台毓璜顶医院肾内科	3	2	1.0	1.0
7	牟贤玉	烟台毓璜顶医院急诊科	2	2	1.0	1.0