产酸克雷伯氏菌基因组文库的构建及鉴定

• 作者: 于晓宇 李云飞 江绍锋 陆祖军 黄金清
• 来源期刊: 广西师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 产酸克雷伯氏菌 基因组文库 pWEBTM质粒 覆盖率 库容
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 151-157
• 页数: 7页
• 分类号: Q933
• 字数: 5144字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16088/j.issn.1001-6600.2016.02.023

摘要

为了给基因功能研究提供基础,以 pWEBTM质粒构建产酸克雷伯氏菌 KO108基因组文库,克隆数目为1329个.通过EcoR Ⅰ酶切分析随机挑取的20个文库克隆的重组质粒,结果显示所有质粒均有8．2 kb载体条带同时含有外源DNA,且外源DNA的带型并不相同,这表明所构建的KO108基因组文库中插入的外源DNA随机性较好.分析外源DNA电泳条带的大小,结果显示克隆的外源DNA片段最小约为25 kb,最大约为50 kb,平均大小估算为40 kb,文库克隆容量约52 Mb,证明该基因组文库包含基因组任意一个基因的概率为99．8％,是KO108基因组覆盖率的5倍.该文库的构建为产酸克雷伯氏菌功能基因克隆和比较基因组学研究奠定了基础.