α-半乳糖神经酰胺负载DC促进CIK细胞对肝癌细胞的杀伤效应

• 作者: 刘红彦 张颖 李栋 王惠 王晶波 盖中涛 陈莉
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 α-GalCer 肝癌 增殖 成熟 肿瘤杀伤活性
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 175-181
• 分类号: R735.7|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.02.004

摘要

目的:研究负载α-半乳糖神经酰胺(alpha-galactosylceramide,α-GalCer)的DC功能与成熟度的改变情况,探讨α-GalCer-DC与CIK共培养对CIK细胞表型、增殖活性及杀伤肝癌细胞效率的影响.方法:采用密度梯度离心法从人外周血中分离出单个核细胞,悬浮细胞诱导培养CIK细胞,贴壁细胞诱导培养DC;流式细胞仪检测α-GalCer负载DC的表型,Real-time PCR检测DC相关基因的mRNA表达改变.将α-GalCer-DC与CIK细胞共培养,流式细胞仪检测DC与CIK细胞表面标志物;锥虫蓝染色法检测CIK细胞的增殖倍数;Real-time PCR检测CIK细胞功能相关基因的表达情况;CCK-8试剂盒检测α-GalCer-DC对CIK杀伤HepG2细胞的影响.结果:经过多种细胞因子诱导,可获得CIK细胞和成熟的DC;α-GalCer负载可促进DC成熟,DC表面标志物CD80、CD86、CD83和CD11c的阳性率均升高(P＜0.05或P＜0.01),表面趋化因子受体CCR-7、IL-12、IL-10的mRNA水平升高(P＜0.05).α-GalCer-DC与CIK共培养,可显著提高CIK细胞CD3+ CD56+的表达和增殖活性(P＜0.05或P＜0.01),并显著提高INF-γ、IL-12、穿孔素和颗粒酶素B的mRNA表达水平(P＜0.05或P＜0.01);CIK、DC-CIK、α-GalCer-DC-CIK细胞对HepG2细胞的杀伤作用随效靶比的升高而增强,在同一效靶比时α-GalCer-DC-CIK细胞对靶细胞的杀伤作用最强(P＜0.05).结论:α-GalCer负载可促进DC成熟,α-GalCer-DC与CIK共培养能促进后者增殖和成熟,能显著增强其对肝癌细胞的杀伤活性,为DC-CIK在肿瘤免疫治疗中的应用提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晶波	济南市传染病医院三科	20	121	5.0	10.0
2	张颖	山东省千佛山医院重症医学科	5	32	2.0	5.0
3	盖中涛		41	26	3.0	4.0
4	陈莉		3	10	2.0	3.0
5	刘红彦	山东大学医学院	1	1	1.0	1.0
6	王惠		1	1	1.0	1.0
7	李栋		1	1	1.0	1.0