猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810的鉴定及LBD区表达

• 作者: 侯俊玲 刘光学 张少华 杨锐 郭爱疆 骆学农 魏艳玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪带绦虫 胰岛素受体 鉴定 LBD 表达
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 442-446
• 页数: 5页
• 分类号: R383
• 字数: 3454字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.05.005

摘要

目的 克隆鉴定猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810基因,并表达其LBD区.方法 设计猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810特异性引物,并分段进行RT-PCR扩增.TsIR-4810的完整ORF序列经BLAST同源比对,SMART预测其结构域,SWISS-MODEL同源建模,并用PhyML构建系统发育树.将TsIR-4810的LBD区克隆至pET-30a中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot鉴定.结果 获得的目的基因完整的ORF为4 920 bp,其编码蛋白的氨基酸序列与其他生物的胰岛素受体一样,具有相对保守的分泌信号肽、受体L1和L2结构域、FnⅢ结构域、跨膜区和受体酪氨酸激酶域.构建的LBD重组菌株诱导表达了63 ku的目的蛋白,与预期大小相符,且主要以包涵体形式存在.结论 TsIR-4810为猪带绦虫胰岛素受体基因,其LBD区的成功表达,将为开展基于胰岛素受体LBD区的新型疫苗和药物奠定基础.