亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2的克隆表达及免疫鉴定

• 作者: 余新炳 周灵贵 廖兴江 戴佳琳 申萍香 胡旭初 郎书源 黄江
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 亚洲牛带绦虫 泛素缀合酶E2 基因克隆 原核表达 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 395-398
• 页数: 4页
• 分类号: R383.3
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆表达亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2(UBC E2)全长编码序列,获得纯化的重组蛋白,为进一步功能研究做充分准备.方法 以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含有UBC E2基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠杆菌BL-21/DE3中用IPTG诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,并使用Western blotting分析其免疫反应性.结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-UBC E2构建成功,该基因在大肠杆菌中以包涵体形式得到表达,十二烷基肌氨酸钠纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠杆菌BL-21/DE3得到高效表达,亲和层析得到高纯度的蛋白且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫患者血清识别,表明其有免疫反应性.结论 亚洲牛带绦虫UBC E2可在原核表达系统中表达,并具有免疫反应性,为进一步研究该基因的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	胡旭初	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	108	574	13.0	17.0
3	黄江	贵阳医学院多媒体形态学实验室	76	329	11.0	14.0
4	廖兴江	贵阳医学院多媒体形态学实验室	46	215	8.0	12.0
5	戴佳琳	贵阳医学院多媒体形态学实验室	38	96	5.0	7.0
6	申萍香	贵阳医学院多媒体形态学实验室	20	58	4.0	6.0
7	周灵贵	贵阳医学院多媒体形态学实验室	17	40	3.0	5.0