亚洲牛带绦虫36kDa胞浆型苹果酸脱氢酶基因的表达、纯化及免疫学分析

• 作者: 余新炳 包怀恩 廖兴江 徐劲 胡旭初 郎书源 黄江
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 亚洲牛带绦虫 苹果酸脱氢酶基因 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 655-658
• 页数: 4页
• 分类号: R383.3
• 字数: 2590字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.07.015

摘要

目的 对亚洲牛带绦虫胞浆型苹果酸脱氢酶基因(malate dehydrogenase,MDH)进行克隆、表达和免疫学研究.方法 将亚洲牛带绦虫成虫MDH克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中.在大肠埃希菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定.用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析.结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-30a(+)-TaMDH重组质粒构建成功.SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得高效表达,经亲和层析获得了商纯度蛋白.重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性;并且能识别感染了亚洲牛带绦虫的猪血清.表明其具有免疫反应性.结论 亚洲牛带绦虫苹果酸脱氢酶基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郎书源	贵阳医学院寄生虫学教研室	47	431	11.0	19.0
2	包怀恩	贵阳医学院寄生虫学教研室	110	773	14.0	22.0
3	余新炳	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
4	徐劲	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	104	568	13.0	17.0
5	胡旭初	中山大学中山医学院寄生虫学教研室	108	574	13.0	17.0
6	黄江	贵阳医学院寄生虫学教研室	76	329	11.0	14.0
7	廖兴江	贵阳医学院寄生虫学教研室	46	215	8.0	12.0