外源性一氧化碳释放分子2体外干预对内毒素/脂多糖刺激人中性粒细胞胞外诱捕网形成的作用及其机制

• 作者: 孙炳伟 宋明明 庄明峰 张艺森 徐晓涵 王旭 秦魏婷
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 脓毒症 脂多糖类 外源性一氧化碳释放分子2 中性粒细胞 中性粒细胞胞外诱捕网
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 感染与免疫
• 页码范围: 82-88
• 页数: 7页
• 字数: 5572字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2016.02.006

摘要

目的 探讨外源性一氧化碳释放分子2(CORM-2)对LPS刺激人中性粒细胞胞外诱捕网(NET)形成的作用及其机制. 方法 采集1名健康成年志愿者的静脉血,分离出中性粒细胞后,按随机数字表法分为正常对照组、LPS组、LPS+ 10 μmol/L CORM-2组、LPS+ 50 μmol/L CORM-2组、LPS+无活性CORM-2(iCORM-2)组.正常对照组不进行任何处理;LPS组采用1μL 1μg/mL的LPS刺激;LPS+ 10 μmol/L CORM-2组、LPS+ 50 μmol/L CORM-2组、LPS+ iCORM-2组在采用上述相同剂量LPS刺激的同时,分别采用10 μmol/L CORM-2、50 μmol/L CORM-2、50 μmol/L iCORM-2各1μL进行干预,常规培养1h后检测相关指标.用碘化丙啶染色标记法检测NET数量,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率,二氢罗丹明123荧光探针法检测活性氧生成水平(结果以平均荧光强度表示),蛋白质印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达水平.每组以上4个实验样本数均为5.对数据行单因素方差分析、SNK检验. 结果 (I)LPS组和LPS+ iCORM-2组细胞每400倍视野下NET数量与正常对照组相近(P值均大于0.05).LPS+10 μmol/L CORM-2组和LPS+50μmol/L CORM-2组细胞每400倍视野下NET数量较正常对照组和LPS组均明显增多(P值均小于0.05).LPS+ iCORM-2组细胞每400倍视野下NET数量与LPS组相近(P＞0.05).(2)LPS组、LPS+ 10 μmol/L CORM-2组、LPS+ 50 μmol/LCORM-2组、LPS+ iCORM-2组细胞早期凋亡率较正常对照组明显增加(P值均小于0.05),LPS+10 μmol/L CORM-2组、LPS+ 50 μmol/L CORM-2组、LPS+ iCORM-2组细胞早期凋亡率与LPS组相近(P值均大于0.05).(3)LPS组、LPS+ 10 μmol/LCORM-2组、LPS+ iCORM-2组细胞活性氧生成水平高于正常对照组(P值均小于0.05),LPS+50 μmol/L CORM-2组细胞活性氧生成水平与正常对照组相近(P＞0.05).LPS+10 μmol/LCORM-2组和LPS+ 50μmol/L CORM-2组细胞活性氧生成水平明显低于LPS组(P值均小于0.05),LPS+ iCORM-2组细胞活性氧生成水平与LPS组相近(P＞0.05).(4) LPS组和LPS+ iCORM-2组细胞磷酸化ERK1/2表达水平分别为0.031 1±0.001 4和0.030 9±0.0018,与正常对照组的0.030 4±0.004 6相近(P值均大于0.05);LPS+ 10 μmol/L CORM-2组和LPS+ 50 μmol/L CORM-2组细胞磷酸化ERK1/2表达水平分别为0.789 1±0.020 1和1.297 0±0.005 6,高于正常对照组(P值均小于0.05).LPS+ 10 μmol/L CORM-2组、LPS+ 50 μmol/L CORM-2组细胞磷酸化ERK1/2表达水平高于LPS组(P值均小于0.05),LPS+ iCORM-2组细胞磷酸化ERK1/2表达水平与LPS组相近(P＞0.05). 结论 CORM-2干预可以明显增加LPS刺激后NET的形成,其机制可能与CORM-2抑制活性氧生成和促进ERK1/2磷酸化有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙炳伟	江苏大学附属医院烧伤整形科	58	264	9.0	12.0
2	王旭	江苏大学附属医院烧伤整形科	28	57	4.0	6.0
3	宋明明	江苏大学附属医院烧伤整形科	6	24	3.0	4.0
4	秦魏婷	江苏大学附属医院烧伤整形科	8	37	3.0	5.0
5	庄明峰	江苏大学附属医院烧伤整形科	6	14	3.0	3.0
6	张艺森	江苏大学附属医院烧伤整形科	3	13	2.0	3.0
7	徐晓涵	江苏大学附属医院烧伤整形科	4	13	2.0	3.0