机械牵张刺激下大鼠皮肤再生的关键基因筛选

• 作者: 余庆雄 单圣周 李青峰 汪景 高宇
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 皮肤扩张 机械牵张 皮肤再生 基因芯片
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 107-110,136
• 页数: 5页
• 分类号: R622+.l
• 字数: 3249字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2016.02.005

摘要

目的：明确机械牵张刺激下大鼠皮肤再生相关基因表达谱的变化，并筛选出其中的关键基因。方法建立大鼠皮肤扩张模型，以未扩张皮肤为对照，以注水量不同分组取材。分别是：对照组（con）、扩张器最终注水60 mL 组（exp60）、扩张器最终注水120 mL组（exp120）、扩张器最终注水180 mL组（exp180）。取材后一部分样本切片行免疫荧光染色，荧光标记增殖标记物Ki67，绘制皮肤细胞增殖曲线。另一部分样本行基因芯片检测，检测mRNA表达谱的变化，并利用t检验和差异表达的倍数变化（FC值）筛选出关键基因。筛选出皮肤再生的关键基因后，用PCR方法验证以确认该基因的表达量，及其与皮肤增殖之间的关系。结果免疫荧光染色显示，增殖标记物Ki67在各组的表达量由高到低依次是：con、exp180、exp60和exp120。本研究筛选出不同机械牵张刺激下大鼠皮肤再生的11个差异基因，分别为：Myh1、Myh2、Myh3、Myh4、Car6、Pi15、Apt12a、Mt1a、Cthrc1、Rsad2和IGF-BP5。其中IGF-BP5和对照组的皮肤内表达相比为下调基因；PCR验证得出，IGF-BP5在各组的表达量由高到低依次是：exp120、exp60、exp180和con。结论机械牵张刺激下，随着扩张时间及扩张量的增加，大鼠皮肤再生呈现早期皮肤细胞增殖加速，中期增殖活跃，后期增殖减缓的趋势；且IGF-BP5可能为影响机械牵张刺激下大鼠皮肤再生的关键基因。