猪BMSCs成脂分化中细胞膜钙离子通道、钙敏感受体及成脂定向相关基因表达研究

• 作者: 叶晶晶 张枫琳 朱晓彤 束刚 江青艳 王丽娜 王松波 艾玮 高萍
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪骨髓间充质干细胞 钙离子通道 钙敏感受体 成脂定向 Zfp423基因 BMP基因 Pref-1基因
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: S831
• 字数: 3907字
• 语种: 中文

摘要

【目的】研究猪骨髓间充质干细胞( Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)定向分化为脂肪细胞过程中细胞膜上钙离子通道、钙敏感受体( Calcium-sensing receptor,CaSR)基因及成脂定向相关基因的表达。【方法】从5~7日龄仔猪骨髓中分离纯化出猪BMSCs,诱导猪BMSCs成脂分化。油红O法和三酰甘油法检测细胞分化聚酯状况。在成脂分化不同时间(0、1、2、5和10 d)收集细胞,利用荧光定量PCR检测锌指蛋白423(Zinc finger protein 423, Zfp423)、脂肪前体细胞因子(Preadipocyte factor 1, Pref-1)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2, BMP2)、骨形态发生蛋白4(Bone morphogenetic protein 4, BMP4)、细胞膜钙离子通道及CaSR基因的mRNA表达变化。【结果】油红O染色和三酰甘油检测结果表明,成功诱导猪BMSCs成脂分化；定量PCR结果显示,在猪BMSCs成脂分化第5天,成脂定向标志基因Zfp423、脂肪前体细胞标志基因Pref-1及促进成脂分化基因BMP2、BMP4的mRNA相对表达量显著提高(P<0．05),说明第5天是猪BMSCs成脂定向形成脂肪前体细胞的关键时期；同时,细胞膜上的电压门控钙离子通道亚基电压依赖型α/δ亚型1(Voltage-dependentalpha-2/delta subunit 1, CACNA2D1)、钙释放激活钙通道调节分子1(Calciumr elease-activated calcium channel modulator 1, Orai1)、瞬时受体电位通道传统型1(Transient receptor potential canonical type 1,TRPC1)、瞬时受体电位通道M型7(Transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)、瞬时受体电位通道香草素受体亚型1(Transient receptor potential vanilloid receptor1,TRPV1)基因和CaSR基因在诱导成脂第5天mRNA相对表达量也显著提高(P<0．05),提示细胞膜钙离子通道及CaSR基因可能参与了猪BMSCs成脂分化过程。【结论】揭示了猪BMSCs成脂分化过程中细胞膜钙离子通道、钙敏感受体及成脂定向相关基因的表达模式。