dGFP-GUS基因标记新疆棉花黄萎病原菌的研究

• 作者: 刘步仓 华东来 孔德真 王爱英 王秀珍 祝建波
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: trpc启动子 农杆菌介导转化 GFP-GUS 棉花黄萎病菌
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 分类号: S435.62
• 字数: 5929字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2016.01.001

摘要

[目的]研究棉花黄萎病原菌的入侵机理.[方法]以带有潮霉素抗性筛选基因的PUCCATPH载体以及pCAMBIA1304载体作为骨架,构建trpc启动子驱动的GFP-GUS基因的新疆棉花黄萎病菌表达载体1304-P-ORF,导入农杆菌GV3101和AGL-1中.通过农杆菌介导(ATMT)法分别转入新疆棉花黄萎病原菌VD-1和VD-278中,对表达效果进行检测.[结果]筛选的潮霉素B浓度为30 μg/mL,农杆菌AGL-1对黄萎病菌的转化效率比GV3101高40％.T0代经含有潮霉素B的PDA培养基筛选,获得了T1代转基因大丽轮枝菌VD-12株,VD-2 784株.通过GUS组织染色,在转基因VD-1和VD-278的菌丝和孢子中均可观察到GUS基因的表达.对转基因黄萎菌进行PCR分子检测,均可检测到GFP和潮霉索B基因.GUS-GFP和潮霉素B基因已成功转入新疆棉花黄萎菌VD-1和VD-278中.[结论]建立了新疆棉花黄萎菌的遗传转化体系,为进一步利用GFP-GUS基因研究新疆棉花黄萎菌对棉花侵染的过程奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔德真	新疆石河子大学生命科学学院	3	12	2.0	3.0
2	祝建波	新疆石河子大学生命科学学院	10	42	4.0	6.0
3	王爱英	新疆石河子大学生命科学学院	17	49	4.0	5.0
4	华东来	新疆石河子大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
5	王秀珍	新疆石河子大学生命科学学院	2	11	2.0	2.0
6	刘步仓	新疆石河子大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0