对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒编码蛋白的相互作用研究

• 作者: 苗亮 陈沈雪 陈炯 魏永伟
• 来源期刊: 海洋与湖沼
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性皮下及造血组织坏死病毒 编码蛋白 相互作用 自身互作 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 页码范围: 205-212
• 分类号: S945.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11693/hyhz20150900233

摘要

采用Matchmaker酵母双杂交系统,将对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infection hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)编码蛋白NS1、NS2和CP序列分别构建到酵母猎物载体pGADT7和诱饵载体pGBKT7上,分别转化至酵母AH109以检测重组猎物载体和诱饵载体的自激活作用及对宿主的毒性作用,发现无自激活作用和毒性作用,随后将重组猎物载体和诱饵载体两两共转至酵母AH109中,涂布于SD/-Leu/-Trp固体培养基上,再点种至SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal固体培养基以鉴定编码蛋白间的相互作用.表型鉴定结果显示,只有共转化有pGADT7-CP/pGBKT7-CP的酵母重组子能够在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal上生长并显蓝,而其它重组子均不能在其上生长,表明病毒的CP能够自身互作,而其他编码蛋白间无相互作用.为了进一步研究病毒CP自身互作的作用位点,分别从CP的N端和C端截短若干个氨基酸序列,结果发现CP的自身互作是高度敏感的,任何较少氨基酸序列的缺失都将导致其自身互作的丧失.本研究为深入探讨病毒的组装机制和致病机理奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈炯	宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室	100	594	13.0	18.0
2	苗亮	宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室	43	184	8.0	10.0
3	魏永伟	宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室	7	14	2.0	3.0
4	陈沈雪	宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室	1	0	0.0	0.0