不同培养体系对鼠-猪异种嵌合胚胎发育和嵌合能力的比较

• 作者: 任吉龙 刘忠华 周琪 宋玉然 海棠 王颖
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 异种嵌合 诱导性多潜能干细胞 嵌合注射 体外发育 猪
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 生物技术与方法
• 页码范围: 975-985
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.150433

摘要

近年来,随着干细胞分化与再生医学研究的不断深入,异种嵌合已成为当前干细胞和再生医学领域的热点问题,并有望为未来解决器官移植供体来源严重短缺等再生医学难题开辟新的方向.异种嵌合以及异种器官再造过程中面临众多科学问题和技术难题,而异种嵌合过程中嵌合胚胎时期的选择,后续培养液的选择以及这些环节所造成的供体细胞与受体胚胎之间的发育平衡成为建立异种器官再造的第一个科学问题.猪由于具有与人类器官大小相似、繁殖快等特点,成为异种嵌合最适合的潜在研究对象.为了提高鼠-猪异种嵌合胚胎中小鼠供体细胞——诱导多潜能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs)的存活率和增殖率,我们尝试以iPSCs培养液(N2B27)以及N2B27--→PZM-3梯度更换的培养液(N2B27(3.5 h))作为研究异种嵌合胚胎体外发育培养的对象,并与猪胚胎培养液(PZM-3,Porcine zygotic medium)体系下发育进行比较,从而评价了这3种培养液在8-细胞和囊胚期注射后,对嵌合胚胎后续发育的影响及嵌合情况.结果显示,8-细胞期注射后,PZM-3不仅对嵌合胚胎的后续发育较为有利,更有利于小鼠iPS嵌合到猪胚胎中;囊胚期注射后3种培养体系下GFP阳性嵌合率差异不显著,但其嵌合率显著低于8-细胞期嵌合率.结果表明,PZM-3培养体系更有利于鼠-猪异种嵌合胚胎的体外发育,对8-细胞期胚胎进行嵌合操作有益于提高鼠-猪异种嵌合后胚胎的嵌合率.