对香豆酰辅酶A酯生物合成及纯化方法

• 作者: 任百光 潘琛 盖颖
• 来源期刊: 北京林业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 对香豆酰辅酶A酯 4-香豆酸辅酶A连接酶 C18反相柱 高效液相色谱 质谱 核磁共振
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究方法 Research Methods
• 页码范围: 120-124
• 页数: 5页
• 分类号: Q554+9|S718.43
• 语种: 中文
• DOI: 10.13332/j.1000-1522.20150366

摘要

木质素是绿色植物生长发育所需的重要化合物之一。肉桂酰辅酶A还原酶( CCR)是在木质素合成过程中，催化苯丙烷类合成途径第1步的关键酶。本文以其底物之一———对香豆酰辅酶A酯为例，以现有的辅酶A酯合成纯化的文献报道为参考，介绍经过整合改进并不断试验而得到的CCR底物的合成与纯化方法。从大肠杆菌中提取出来的重组酶4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)用于合成CCR底物，这比从植物组织中提取更易获得。提纯后的4CL可以在-80℃下保存3、4个月。4CL反应后的产物在2个不同梯度下通过C18反相柱进一步纯化，并用高效液相色谱仪监测。在整个纯化过程中，所有用于装载对香豆酸和对香豆酰辅酶A酯的容器都用锡箔纸完全包裹起来。最后提纯出来的产物用质谱和核磁共振检测。检测的结果表明，提纯出来的辅酶A酯单一性非常好。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盖颖	北京林业大学生物科学与技术学院	22	108	6.0	8.0
2	潘琛	北京林业大学生物科学与技术学院	1	2	1.0	1.0
3	任百光	北京林业大学生物科学与技术学院	1	2	1.0	1.0